DARC在基底细胞样乳腺癌中作用机制的研究

Duffy抗原趋化因子受体(DARC)可特异性清除成血管性趋化因子。我们前期工作提示：具有特殊恶性疾病进程的基底细胞样(basal-like)乳腺癌组织中，DARC呈低表达；经DARC转染的基底细胞样乳腺癌细胞MDA-MB-231，裸鼠原位移植瘤的生长明显受到抑制，但其机制不明。本研究通过对基底细胞样乳腺癌细胞MDA-MB-231和MDA-MB-468细胞进行DARC cDNA稳定转染，建立可靠的DARC过表达的裸鼠原位移植瘤模型，采用RT-PCR，ELISA，Western blot等方法分析移植瘤组织中多种趋化因子(CXCL-8,CXCL1-7等)及MMP-9的改变，IHC法检测瘤内MVD，同时检测基底细胞样乳腺癌相关因子ck5/6，EGFR，ERβ，BRCA1，以探求DARC对基底细胞样乳腺癌体内抑制的具体机制，为基底细胞样乳腺癌特异性治疗提供可能的新途径。

背景: DARC可特异性清除成血管性趋化因子。基底细胞样乳腺癌是一种具有特殊恶性疾病进程的乳腺癌基因亚型，本研究通过对基底细胞样乳腺癌细胞MDA-MB-231和MDA-MB-468细胞进行DARC cDNA稳定转染，建立可靠的DARC过表达的裸鼠原位移植瘤模型，以探求DARC在基底细胞样乳腺癌组织中作用的具体机制。重要结果及其科学意义：一、DARC在基底细胞样乳腺癌组织中机制的研究。结果：DARC转染后过表达的MDA-MB-231-DARC和MDA-MB-468-DARC基底细胞样乳腺癌细胞株与野生型细胞株相比，侵袭能力明显降低；体内实验发现移植瘤生长较对照组明显受到抑制。移植瘤组织western blot检测发现DARC过表达的移植瘤组织中CCL2呈低表达，检测细胞信号通路中磷酸化p42/44MAPK表达显著降低，MMP9表达明显减低。该部分研究的科学意义在于：证实了DARC的过表达通过清除移植瘤组织中的CCL2，进而抑制磷酸化p42/44MAPK细胞信号通路及MMP9的表达进而抑制移植瘤组织的生长。二、原发性乳腺癌疾病进展过程中趋化因子的表达及变化。抽取148例临床体检触及乳腺肿块的患者血液（包括良性、原位癌、浸润癌），ELISA方法检测10种趋化因子与受体浓度。结果发现：所有病例组CXCL8、CXCR4和CXCL12浓度有显著差异；良性组分为良性改变亚组、良性改变伴增生亚组及不典型增生亚组，此三组中CCL2及CCR5浓度有显著差异。DARC表达与浸润癌的复发风险显著相关。该部分研究的科学意义在于揭示了趋化因子及受体的浓度的波动在原发性乳腺癌疾病进程的作用。三、CXCR4在乳腺癌中的表达及其与Hedgehog信号通路相关性的研究。IHC检测124例乳腺癌组织中CXCR4、Smo、Ptch的表达情况，结果揭示了乳腺癌组织中当CXCR4与Hedgehog信号通路同时表达时或许与乳腺癌的复发风险增高相关。四、维生素D受体基因多态性与乳腺癌发病风险的相关性荟萃分析。结果发现FokI基因中，等位基因f相对于F与乳腺癌风险增加相关。种族亚组分析中，高加索人群中具有Fok1多态性与乳腺癌高患病风险显著相关。亚洲人群中，ApaI基因中aa基因型与增高的乳腺癌患病风险相关。