LncRNA GAS5调控乙型肝炎病毒复制的分子机制

HBV infection is widely prevalent in the world, in-depth study of HBV replication regulation mechanism will help to understand the pathogenesis of HBV and at the same time promote the development of new methods of antiviral therapy. The expression of LncRNA GAS5 in HBV-infected liver tissue and HBV replication cells was significantly down-regulated by previous studies. It was found that LncRNA GAS5 could significantly inhibit the expression of HBV replication intermediates and HBV protein. Based on the above findings, this study will comprehensively study the effect of LncRNA GAS5 on HBV replication and analyze the molecular mechanism of LncRNA GAS5 in the regulation of HBV replication from the perspective of LncRNA-miRNA. Finally, we further confirmed the regulation of LncRNA GAS5 on HBV replication in animal experiments. This study will help to understand the role of LncRNA, a small molecule of host, in the replication of HBV virus, enrich the understanding of host LncRNA-miRNA-pathogen infection pathway, and provide new methods and strategies for clinical antiviral therapy.

HBV感染呈世界范围内广泛流行，深入研究HBV复制的调控机制，将有助于深入了解HBV致病机理并同时促进抗病毒治疗新手段的发展。通过前期研究发现LncRNA GAS5在HBV感染肝组织及HBV复制细胞中的表达水平明显下调，进一步研究发现LncRNA GAS5可明显抑制HBV复制中间体及HBV蛋白的表达。基于以上发现，本项目将全面研究LncRNA GAS5对HBV复制的影响，并从LncRNA-miRNA角度深入解析LncRNA GAS5调控 HBV复制的分子机制，最后在动物实验中进一步证实LncRNA GAS5对HBV复制的调控作用。本研究将有助于了解宿主内源性小分子物质LncRNA在HBV 病毒复制中的作用，丰富人们对宿主LncRNA-miRNA-病原感染调节通路的认识，为临床抗病毒治疗提供新的方法与策略。

长链非编码RNA（LncRNA）调节基因或蛋白的表达，已有很多研究证明LncRNA生长阻滞剂特异性转录本5 (GAS5)可以影响细胞增殖、细胞分化以及癌症的进展，并且影响病毒复制，而乙肝是由乙型肝炎病毒损伤肝细胞导致的，乙肝病毒致肝细胞慢性炎症病变、肝硬化、肝癌导致严重的后果。在本研究中，我们分别通过过表达和敲低LncRNA GAS5在HepG2215细胞中，在未加四环素与加四环素的HepAD38细胞中分析研究HBV复制的变化。我们发现过表达LncRNA GAS5，HBV3.5KbmRNA的表达升高，敲低LncRNA GAS5，HBV3.5KbmRNA的表达则降低，进一步分析发现miR222-3p可以与LncRNA GAS5作用影响HBV3.5kbmRNA的表达，并且胞质胞核实验发现LncRNA GAS5与miR222-3p相互作用的部位在细胞核，FISH实验进一步证实了LncRNA GAS5定位在细胞核起作用。荧光素酶实验结果表明LncRNA GAS5与miR222-3p结合进而影响HBV复制，功能实验Elisa证明LncRNA GAS5可以影响HBcAg的表达。总之，我们的研究发现LncRNA GAS5可以通过调节miR222-3p而影响HBV复制，随着我们对LncRNA GAS5的功能了解增加，将为乙肝分子靶向治疗提供更多的思路。