牙龈卟啉单胞菌PG2135蛋白抑制人类牙龈上皮细胞凋亡的研究

牙龈卟啉单胞菌（P.gingivalis）为牙周病重要致病菌。P.gingivalis能够 侵入人类牙龈上皮细胞（HGEC），在细胞内生存繁殖，并侵入深层牙周组织，最终导致牙周感染加重。细菌侵入细胞后，P.gingivalis基因发生调控，抑制凋亡的调控过程是P.gingivalis感染牙周组织的重要机制。前期工作中我们发现在不同牙周状态下P.gingivalis的致病性基因pg2135表达存在差异，并发现在细菌侵入HGEC后pg2135基因上调，HGEC细胞凋亡受到抑制。我们拟通过蛋白表达载体提取PG2135蛋白，采用绿色荧光蛋白进行亚细胞定位分析。运用插入失活方法构建P.gingivalis pg2135结构域基因突变菌株，研究PG2135蛋白通过JAK/STAT/SURVIVIN和PI3K/AKT/SURVIVIN信号转导通路对HGEC凋亡的抑制作用，为牙周病的治疗提出新的思路。

牙龈卟啉单胞菌（P. gingivalis, Pg）为牙周病的重要致病菌之一。人类牙龈上皮细胞(HGEC)是牙周组织防御的第一道天然屏障。2D电泳和质谱分析表明PG2135突变菌株与P. gingivalis W83之间蛋白存在差异，但PG2135 突变株内化牙龈上皮细胞未检测到明显的全细胞作用。本研究表明Pg能够内化于HGEC，在细胞内生存繁殖，导致牙周感染的加重。Pg内化HGEC后通过下调caspase-3/9活性，抑制十字胞碱诱导的细胞凋亡，PI3K/AKT信号通路参与Pg对牙龈上皮细胞凋亡的抑制，但 caspase-9活性下降并不受AKT激酶影响，Pg 通过降低细胞bad mRNA的表达和磷酸化bad来抑制牙龈上皮细胞凋亡。Pg内化HGEC能够使牙龈上皮细胞快速通过G1期，加速细胞G1/S期的转换，同时Cyclin D、Cyclin E高表达和提前表达，促进细胞的增殖。JAK/STAT3信号通路参与Pg内化的HGEC加速细胞周期的过程。Pg加速细胞周期和抑制凋亡，为细菌的复制和定植创造条件，是Pg感染牙周组织，达到牙周组织深层的重要机制和策略。我们期望发现一种途径阻断Pg内化HGEC细胞周期和凋亡改变，减少牙周感染加重及复发的可能。