端粒酶逆转录酶(hTERT)在胃癌转移与复发中的作用及意义：与上皮-间质移行（EMT）及胃癌干细胞的关系

胃癌和其它癌症的转移，复发是疾病致死的最重要原因。已知端粒酶逆转录酶（hTERT）的诱导表达，端粒酶活化在癌变过程中赋予恶性细胞无限增殖能力，但在肿瘤转移，复发中的作用所知甚少。最近研究表明上皮-间质移行（EMT）通路激活是肿瘤转移的重要机制，而肿瘤干细胞（CSC）的存在是肿瘤复发的根源。本课题探讨hTERT对EMT和CSC的作用。利用分子生物学技术，动物实验等方法，我们将分析hTERT过表达及沉默对胃癌细胞EMT，体内外侵袭，转移能力的影响，对胃癌干细胞表型，自我更新，致瘤性等的作用。染色质免疫沉淀，基因芯片，亲和层析-质普测序等将用于研究hTERT在EMT，CSC中的作用机理，以发现未知的与肿瘤转移，胃癌干细胞相关的hTERT 伴侣因子。研究结果将有助于全面理解hTERT在肿瘤发生发展中的作用，设计合理的抗hTERT/端粒酶方案用于防治肿瘤的转移与复发，具有重要生物学和临床意义。

本课题围绕端粒酶在肿瘤发生发展中的作用展开，取得主要成果如下：（1）端粒酶逆转录酶(telomerase reverse transcriptase, hTERT) 在上皮细胞向间质细胞移行(epithelial-mesenchymal transition, EMT) 及癌症干细胞(cancer stem cell, CSC)中的作用。我们的结果显示, hTERT过表达诱导癌细胞EMT和CSC表型，促进癌细胞体内外侵袭转移能力，而沉默hTERT表达可严重损害癌细胞的侵徙, CSC自我更新能力。我们又进一步发现hTERT这些活性不依赖于它的端粒延长功能，而是和beta-catenin形成复合体，活化beta-catenin靶基因，从而诱导EMT以及CSC表型。这些结果表明hTERT通过刺激EMT和CSC表型在癌症病变进展中发挥重要生物学作用。此外，这些发现也提示hTERT及端粒酶在人类胚胎发育中的可能作用，具有重要生物学意义。（2）人精液在活化端粒酶及其与宫颈癌发生的关系。研究发现，人类的精液能促进宫颈癌的发生，但是发生的机制尚不明确。我们研究精液对hTERT表达和端粒酶活性的影响，结果显示，精液显著提高原代宫颈上皮细胞和宫颈癌细胞株中hTERT mRNA的表达和端粒酶活性。我们进一步阐明精液激活端粒酶的分子机制是通过cyclooxygenase-2 (COX2)-前列腺素E2通路实现。上述研究发现对于深入理解端粒酶在恶性肿瘤中的作用，合理设计端粒酶为靶点的癌症治疗具有重要意义。此外，通过本课题研究，培养了数名研究生及学术骨干，进一步完善学术梯队的建设。