少突胶质细胞分化在宫内感染后脑白质损伤中的作用及机制

宫内感染后细胞因子和炎症分子可能通过影响少突胶质细胞（OL）的分化发育行为而导致脑白质损伤。生理条件下，Notch1信号在维持OL的分化发育中起关键作用，但宫内感染后Notch1信号是否在导致脑白质损伤中起调控作用尚不清楚。我们通过建立宫内感染大鼠模型，研究脑白质损伤的发生；同时观察宫内感染后不同时间脑内不同部位Notch1信号的表达特点，研究宫内感染后未成熟脑Notch1信号活化的时空特性；以及取胎鼠脑组织细胞培养，观察未成熟OL的分化障碍，同时进行细胞转染Notch1 ICD基因和RNAi技术抑制Notch1基因，研究Notch1信号对宫内感染后未成熟OL分化发育的调控作用；且对脑白质损伤的新生大鼠予脑室内注入γ-分泌酶抑制剂（MW167），探讨抑制Notch1信号活化是否能改善宫内感染后脑白质损伤的病理变化。从细胞分化成熟角度进一步阐明宫内感染导致早产儿脑白质损伤的发生机制。

神经胶质细胞和炎症-发育信号可能参与宫内感染/炎症后未成熟脑脑白质损伤的机制。本项目通过建立宫内感染大鼠模型，研究未成熟脑脑白质损伤及神经发生，以及探讨对仔鼠认知功能的影响，并研究感染/炎症对未成熟脑神经细胞增殖和分化的影响和Notch1信号是否参与这一过程；而且探讨cAMP反应序列结合蛋白（CREB）信号通路调节宫内炎症后仔鼠海马神经发生的分子机制。结果表明宫内感染/炎症后未成熟脑MBP表达呈一定的时空性， 对照组14日龄仔鼠脑组织出现MBP表达，宫内感染后的14日龄仔鼠脑组织MBP表达减少甚至消失，表明宫内感染/炎症可能改变未成熟脑少突胶质细胞的功能。宫内感染后Notch1及其下游信号分子Hes5表达在19日胎龄及1、3、7日龄仔鼠脑内表达增加现象。 LPS刺激后星形细胞Notch1、Hes1/Hes5存在短暂的表达增加现象，且不同的感染/炎症条件下Notch1 /Hes信号的表达特点是不同的。宫内炎症组仔鼠海马p-Akt、p-CREB与BDNF mRNA和蛋白质表达较对照组显著性升高，而且发现p-Akt、p-CREB、BDNF在海马齿状回有定位表达情况，说明CREB信号通路参与调节宫内炎症脑白质损伤后海马神经发生。LY294002能减少海马神经发生、加重学习记忆和认知功能缺陷并降低p-Akt、p-CREB和BDNF蛋白质表达；Rolipram能促进海马神经发生、改善学习记忆和认知功能缺陷并增加p-Akt、p-CREB和BDNF蛋白质表达；说明Akt/CREB/BDNF信号通路可能是宫内感染/炎症后海马神经发生，学习记忆和认知功能缺陷的重要分子机制。本研究从炎症-发育信号角度进一步说明宫内感染/炎症后未成熟脑脑白质损伤的机制。