复合纳米载体靶向转染鼻咽癌细胞后通过放射诱导e9-CP“基因开关”介导TWIST沉默实现其放疗增敏的研究

上皮-间质转化（EMT）诱导因子TWIST在包括鼻咽癌的多种肿瘤高表达并和其放化疗抵抗有关，在前期沉默肺癌细胞TWIST表达获得化疗增敏的基础上，结合鼻咽癌放疗后仍有相当部分未控或复发的严峻现实，设想如能特异性靶向沉默TWIST在鼻咽癌细胞的表达，可能获得癌细胞的放疗增敏，进而增进放疗效果。由此，本项目拟构建一种壳聚糖超顺磁性纳米微粒，其外包被鼻咽癌细胞特异性单抗，其内包裹e9（放射敏感性增强子）和CP（鼻咽癌特异性启动子）串连组成的"基因开关"调控的、表达针对人TWIST的RNA干扰序列(siTWIST)的质粒载体。此纳米微粒一方面可靶向转染鼻咽癌组织细胞，亦可随淋巴回流进入转移淋巴结,然后转染此处的癌细胞，且可MRI显像后便于放疗精确定位。继而可以X线调控目的片段表达于癌细胞并沉默其TWIST表达，以实现针对鼻咽癌组织和其转移淋巴结的双重特异性放疗增敏，并探讨其分子机制。

放疗是鼻咽癌主要治疗方法，但放疗抵抗可导致鼻咽癌未控或复发。上皮-间质转化（EMT）诱导因子TWIST在多种肿瘤高表达并和其放化疗抵抗有关，我们设想，沉默TWIST表达可显著增强鼻咽癌放疗敏感性。本研究完成的工作有：（1）我们通过循证医学方法发现TWIST在头颈部肿瘤中高表达并和肿瘤进展相关；（2）实验发现鼻咽癌组织中TWIST存在高表达并和微血管密度、淋巴结转移以及远处转移有关，还可影响肿瘤患者生存期；（3）本项目构建了一种壳聚糖超顺磁性纳米微粒，其外包被鼻咽癌细胞特异性单抗，其内包裹e9（放射敏感性增强子）和CP（鼻咽癌特异性启动子）串连组成的“基因开关”调控的、表达针对人TWIST的RNA干扰序列(siTWIST)的质粒载体。（4）此纳米微粒可特异性沉默鼻咽癌细胞内TWIST的表达，显著增强其放疗敏感性，ERK信号通路可能参与此过程；（4）动物实验发现，本载体可沉默移植瘤内TWIST表达，还可随淋巴回流进入转移淋巴结,然后转染此处的癌细胞，实现移植瘤和淋巴结的放疗增敏。