不对称还原生产麻黄碱的生物耦合系统的研究

拟从已筛选得到的能够不对称还原1-苯基-2-甲氨基丙酮（MAK）为麻黄碱的菌株Morganella morganii出发，分离纯化得到全新的羰基不对称还原酶；设计引物，通过PCR扩增出该羰基不对称还原酶基因，并以质粒骨架及诱导物安全为基础，构建安全高表达载体，通过强启动子高效表达目的基因；同时研究全新羰基不对称还原酶的酶学性质、酶蛋白结构和催化机理，揭示酶结构或辅因子对产物l-或d-Ψ-构型的转化机理。.进一步将羰基不对称还原酶基因与葡萄糖脱氢酶基因（GDH）基因插入同一载体，在同一宿主中的共同表达，以重组菌株为对象，对生物转化反应所需添加的葡萄糖、NADH(NADPH)、前手性物质MAK等进行量化，提高单一l-和d-Ψ-构型产物光学纯度和摩尔浓度，完成稳定可控的生物还原耦合系统。