microRNA-340在慢性心力衰竭中的作用及其作为新的抗心衰靶点的实验研究

充血性心力衰竭（心衰）严重威胁着中国人民的健康，其发病机制仍未阐明，缺乏有效的防治措施。microRNA在细胞生长、分化、凋亡等生命活动中起重要的调控作用。我们在前期应用microRNA芯片和荧光定量PCR发现miRNA-340在人心衰左心室组织显著下调。运用生物信息学分析显示，与心肌细胞肥大、凋亡密切相关的MAPK、ERK1/2、Akt/GSK3β、PI3K、mTOR信号通路中的很多重要分子为miRNA-340的潜在靶基因。我们拟构建miRNA-340转基因小鼠，观察过度表达miRNA-340能否拮抗压力超负荷或Ang II灌注诱导的心衰，以及对心脏纤维化、心肌细胞凋亡和炎症的影响；并通过慢病毒载体介导miRNA-340在心肌细胞和成纤维细胞过表达或下调，探讨其防治心衰的分子机制。认识miRNA-340的心脏保护功能将有助于阐明心衰的发病机制，并为新型抗心衰药物开发提供依据。

microRNA是一类内源性、非编码调控RNA，在心血管系统发育、分化等生理和病理状况下具有重要的调控作用。慢性心力衰竭是具有很高的发生率和死亡率、严重危害人类健康的病变，但目前其发生和发展机制不清。.通过对终末心衰病人和健康心脏移植供体的左心室进行microRNA芯片和PCR定量分析，我们发现miRNA-340在心衰左室显著上调，提示其可能在心衰发生中具有调控作用。通过构建miRNA-340转基因小鼠，我们对其进行了功能和靶基因分析，从而发现miRNA-340在心衰过程的重要调控作用：与野生型小鼠相比，miRNA-340转基因小鼠对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）和主动脉缩窄的心衰诱导刺激并未产生包括心肌肥厚、心功能下降等心衰表现，从而明确了miRNA-340的心衰保护作用；对包括NF-kB、CU15、MAPK和Akt/GSK3β通路的重要分子进行了荧光素酶报告基因系统靶基因分析和Western Blotting分析从而明确了miRNA-340的抑制心衰作用的靶点。.本课题的完成阐明了miRNA-340在慢性心力衰竭的调控机理，揭示出一系列miRNA-340调控的心衰关键分子，为心衰的发生机理研究提供了理论基础、为其靶向药物的研制提供了有效地选择。