清肠温中方对溃疡性结肠炎大鼠MSP-RON通路的调控机制研究

Recent studies funded by Innovative Research Team of Beijing University of Chinese Medicine（No.2011-CXTD-24）discovered that Qingchagnwenzhong Decoction had an effect on protecting colonic mucosa and anti-inflammation by down-regulating inflammatory mediators secreted by macrophages and repairing colon epithelial cells damage in rats with ulcerative colitis(UC). The molecular mechanism of Qingchangwenzhong Decoction treating UC in MSP-RON pathway was studied in an universally acknowledged DSS induced rat model. We take a lead research on molecular mechanism of MSP-RON pathway in rats with ulcerative colitis, and make a detail research on expression, activity and distribution of MSP and RON, which could confirm targets of Qingchangwenzhong Decoction, making great contribution to clinical application of Qingchangwenzhong Decoction.

在校级创新团队项目（No.2011-CXTD-24）的研究中发现：清肠温中方能显著降低溃疡性结肠炎大鼠巨噬细胞分泌的炎症介质，修复结肠上皮细胞的损伤，具有显著的抗炎和肠黏膜保护作用。本课题组采用国际上公认的葡聚糖硫酸钠（DSS）诱导的方法建立溃疡性结肠炎大鼠模型，率先进行溃疡性结肠炎MSP-RON通路调控机制的研究，研究清肠温中方对大鼠溃疡性结肠炎MSP-RON通路的影响，基于MSP的活化、RON的表达与活性研究清肠温中方对溃疡性结肠炎MSP-RON通路的调控机制，明确清肠温中方治疗溃疡性结肠炎的作用靶点，为清肠温中方的临床应用提供实验依据。

溃疡性结肠炎（ulcerative colitis，UC）是一种结肠、直肠的慢性非特异性炎症性疾病，被世界卫生组织列为现代难治病之一，而且目前西医缺乏治疗UC的特效药物。我们的前期研究结果发现，清肠温中方治疗UC患者有显著疗效，但具体作用机制尚不清楚。 因此，本项目利用4.5%DSS溶液建立大鼠UC模型，从MSP-RON通路入手，研究清肠温中方对UC大鼠MSP-RON通路的调控机制，以明确清肠温中方治疗UC的作用靶点，为清肠温中方的临床应用提供实验依据。.首先，本项目利用4.5%DSS溶液成功建立了UC大鼠模型，结果表明模型组大鼠毛色、活动度、潜血、大便性状等一般情况较差，DAI指数最大，病理损伤明显，MPO活性较正常组更高，而经过7天的干预后，各治疗组均有不同程度的好转，可降低DAI指数和下调MPO活性水平，提示，清肠温中方对DSS诱导UC大鼠具有较好的治疗作用。.其次，本项目以MSP/RON通路为入手，检测MSP/RON通路及其下游蛋白的表达和分布。结果显示，DSS诱导的UC大鼠血清MSP的水平、结肠RON的表达水平均较正常组大鼠显著降低，结肠p-AKT/AKT水平、NF-κB的表达水平明显升高，说明促炎机制已被激活，损伤肠黏膜。而经过7天的干预后，清肠温中方能明显促进MSP、RON的表达，降低p-AKT/AKT、NF-ΚBp65的水平，说明清肠温中方可能是通过增强MSP/RON通路的功能，抑制PI3K/Akt通路的促炎作用，降低NF-κB的表达水平，达到抑制炎症反应，修复肠黏膜损伤，最终达到治疗UC的目的。.再次，NF-κB p65作为MSP/RON通路和IP10/CXCR3轴共同的下游因子，因此本次研究检测了IP10、CXCR3蛋白和基因的表达。研究发现，清肠温中方能明显抑制IP10/CXCR3轴的功能，抑制炎症因子的产生和趋化，抑制炎症反应，最终达到治疗UC的目的。.综上，本研究研究了清肠温中方对溃疡性结肠炎MSP-RON通路的调控机制，明确了清肠温中方治疗UC的作用靶点，清肠温中方可能是MSP/RON通路的激活剂，以NF-κB p65为交叉点，与IP10/CXCR3轴共同从正、反两方面调节肠道炎症反应，发挥协同作用，最终达到治疗UC的目的。