子宫内膜异位症合并不育患者在位子宫内膜microRNA的表达和作用机制的研究

子宫内膜异位症(简称内异症)发病机制和致不育机制仍未阐明。在位内膜的研究是突破点之一。miRNA是一种多靶点调控分子，结构稳定和制作成本低，如能明确起关键作用的miRNA，可通过靶基因达到预防和治疗目的。申请者已完成正常和内异症患者内膜的miRNA筛选，在此基础上拟开展如下内容：1）找出内异症合并不育在位内膜特异表达的miRNA，增加样本行RT-PCR验证；2）综合已发现的内异症在位内膜异常相关的基因和蛋白,进行相应miRNA表达的研究并分析相互关系；3）通过构建miRNA表达或抑制载体，逐个转染的方法探索选定的miRNA的作用机制；4）评价5-6条miRNA在行IVF-ET的内异症妇女着床窗口期子宫内膜的表达与妊娠成功率的相关性；5）用我国原创开发的高灵敏miRNA检测技术测宫腔抽吸液内膜细胞miRNA,探索更微创检测内膜miRNA的方法。

子宫内膜异位症(简称内异症)发病机制和致不育机制仍未阐明。在位内膜的研究是突破点之一。miRNA是一种多靶点调控分子，如能明确起关键作用的miRNA，可通过靶基因达到预防和治疗目的。本研究的主要研究内容及进展包括：（1）建立子宫内膜异位症合并不育患者在位内膜样本库，尤其是着床窗口期子宫内膜样本库；增加子宫腺肌症患者在位内膜样本库；建立子宫内膜样本库建设的SOP和人才培养；.（2）应用基因芯片高通量筛查正常女性及内异症女性子宫内膜的mi-RNA表达谱。共筛选出6个差异表达的mi-RNA；联合测序结果、数据库预以及mi-RNA和mRNA的负调控关系，得到与mi-RNA表达呈负相关的交集靶基因36个，构建microRNA -mRNA网，发现 miR -543处于网络的核心位置；进一步研究发现：miR-142-5p和miR-146a-5p在内异症患者着床窗口期的表达水平高于对照组（P＜0.05）；内异症患者着床窗口期miR-543的表达低于卵泡期，而非内异症组的表达趋势相反，提示miR-543周期性变化规律的改变;.（3）筛查结果并结合文献,筛选28条mi-RNA，扩大样本量进行RT-PCR半定量检测，并增加子宫腺肌症患者的在位内膜样本的检测；数据正在分析整理中；.(4).研制子宫内膜取样器，利用宫腔镜的外鞘，达到定点取样，同时避免器械多次进入宫腔，降低并发症。产品已在临床试用，并在申请专利；.（5）本项目发现的与子宫内膜着床相关microRNA，可用于子宫内膜容受性检测（endometrial receptive array ）,对检测反复着床失败的患者子宫内膜容受性是否受损，提前或延迟，及进一步制定个体化的胚胎移植方案有一定的应用前景。