卷烟烟气中主要杂环胺类化合物的体内代谢研究

杂环胺是由蛋白质、氨基酸热解产生的一类化合物，经复杂的代谢过程后产生致癌、致突变性。吸烟者通过抽吸卷烟大量摄入这类有害物质，研究这些物质的体内代谢可以更科学地评估杂环胺对人体的危害性以及吸烟的潜在危险性。但这些化合物及其代谢物含量较低，干扰严重，定性定量分析存在诸多困难。本项目将采用多种选择性好、富集效率高的样品富集方法（包括萃取搅拌棒、纳米材料固相萃取等），对肝微粒体实验模型及吸烟者尿样进行处理，利用液相色谱质谱联用技术建立harman，norharman，AαC和MeAαC主要代谢物的定性、定量分析方法，借鉴模型实验结果，分析吸烟者尿样中杂环胺代谢物的种类和含量，探讨这些化合物在人体内的代谢过程，并比较吸烟者和非吸烟尿样中杂环胺原形物、代谢物的含量差异，寻找杂环胺代谢的生物标志物，为评价吸烟造成的这些致癌物的暴露情况及对人体的危害性提供可靠的数据支持。

本项目以卷烟烟气中主要的杂环胺类化合物为研究对象，采用肝微粒体体外实验、动物体内实验对杂环胺的代谢产物进行定性分析，在此基础上，对吸烟者和非吸烟者体内的杂环胺类化合物的代谢产物进行定性、定量分析，根据吸烟者和非吸烟尿样中杂环胺原形物、代谢物的含量差异，寻找杂环胺代谢的可能生物标志物。主要研究内容包括：（1）采用肝微粒体在体外模拟生理环境条件进行代谢反应，对卷烟烟气中毒性较大、含量较高的AαC进行代谢研究，采用HPLC-DAD及HPLC-TOFMS对代谢产物进行分析和鉴定，推测AαC可能的主要的I相代谢产物；（2）以大鼠为动物模型，采用腹腔注射的方法对大鼠进行染毒，收集24h尿液，对样品处理后，采用HPLC-TOFMS及HPLC-MS/MS对样品进行分析和鉴定，推测AαC可能的I相和II代谢产物；（3）借鉴动物模型实验中的样品处理方法，结合肝微粒体体外实验和动物实验检测到的代谢物，采用HPLC-MS/MS方法，定性分析吸烟者尿样中存在的AαC的代谢产物，并与体外实验和动物实验得到的代谢物进行分析比较；（4）建立了一种同时测定人体尿液中15种杂环胺类化合物原型物的HPLC-MS/MS方法，并对吸烟者尿样和非吸烟者尿样进行测定分析，对数据进行差异分析，寻找卷烟烟气杂环胺类化合物暴露的可能的生物标志物。