肺癌中一种新的BMX非正常剪接体的功能及其作用机制研究

Essential oncogenic drivers in lung cancer are crucial for tumor cell survival, meanwhile they will be the molecular targets for personalized therapy of cancers.Therefore, it is very necessary and important to identify the key molecular pathogenesis in lung cancer.We have performed whole-genome exon array for lung cancer and paired normal tissue from NSCLC patients to facilitate the discovery of abnormal splicing events that could be targets for therapy. We have recently identified a novel spliced variant of BMX, designated as BMXΔN. We will identify the function of BMXΔN in cell model. Further we will demonstrate that a subset of NSCLCs could be caused by the BMXΔN in transgenic mouse model as well as to identify the mechanism involved in lung cancer development. More importantly, we will screen some small molecules to suppress the function of BMXΔN in lung cancer cells, and will suggest BMXΔN as a new therapy target with potential value in personalized diagnosis and treatment of lung cancer.

肺癌中存在的关键致病基因对肿瘤细胞的存活是至关重要的，同时它们也将为肺癌的临床个体化治疗提供有效的分子靶标，因此研究这些基因的功能具有重要的意义。本课题将通过对肺癌临床样本及其癌旁组织进行全基因组外显子芯片分析，利用生物信息学方法比较所有基因的外显子表达差异来快速鉴定基因的非正常剪切。我们鉴定了BMX的一种新的非正常剪切形式，将之命名为BMXΔN。本课题我们将利用肺癌细胞株来研究BMXΔN基因在肺癌细胞增殖、克隆形成、细胞迁移以及抗药等过程中的作用；通过转基因小鼠模型验证BMXΔN基因在肺癌发生发展中的作用,并结合生化与细胞实验来探讨其致病机制；筛选特异性抑制BMX基因的小分子化合物,在细胞和动物模型中进行分子靶向治疗的研究。因此该课题在阐明BMXΔN功能和分子机理的基础上，将有可能为肺癌患者的临床个体化治疗提供新的分子靶标。

肺癌中存在的关键致病基因对肿瘤细胞的存活是至关重要的，同时它们也将为肺癌的临床个体化治疗提供有效的分子靶标。非受体酪氨酸激酶BMX在多种实体瘤中促进肿瘤的发生发展，BMX可变体在肺癌中是否发挥功能有待于研究。本课题通过对肺癌临床样本及其癌旁组织进行全基因组外显子芯片分析，利用生物信息学方法比较所有基因的外显子表达差异来快速鉴定基因的非正常剪切。我们鉴定了BMX的一种新的非正常剪切形式，将之命名为BMXΔN。通过基因末端快速克隆技术结合测序以及特异性PCR我们发现BMXΔN缺失了BMX的1到8号外显子，它存在于12%的肺腺癌人群。在癌旁对照中未检测到BMXΔN，而且它在肺腺癌中与EGFR突变成正相关。进一步我们研究它的功能，发现BMXΔN能够促进肺癌细胞的增殖、细胞转化，增强细胞的侵袭迁移能力。还发现BMXΔN在肺癌上皮细胞-间充质转化中发挥作用，可能通过此分子机制介导了细胞对吉非替尼的耐药。在肺癌细胞中BMXΔN能够提高ERK的磷酸化水平，因此它可能通过激活MAPK信号通路发挥它的致癌作用。最后，我们筛选了一些能够抑制BMXΔN功能的激酶抑制剂，期望为临床肺癌联合靶向治疗提供一些实验依据。