Flt-1及microRNA调控在乳腺癌转移和血管生成中作用机制研究

Breast cancer is one of the most common malignant tumor in wowan, the main cause of its death are tumor metastasis and relapse. Flt-1 has been identified as a key component of a 'poor prognosis gene signature' that is strongly predictive of a short interval to distant metastases and Flt-1 expression in primary tumors has been correlated with a high risk of metastasis and relapse.However，the function of Flt-1 in breast cancer remains largely unknown. With supported by National Natural Science Foundation of China，we have previously identified Flt-1 is a potential target of miR-10b,and miR-10b inhibited Flt-1 expression; hypoxic stimulation promoted the expression of Flt-1 in breast cancer;and miRNAs were involved in this process. To examine the function of Flt-1 in breast cancer, we plan to screen and validate miRNAs regulated expression of Flt-1,explore its molecular mechanism by hypoxia and extensively implicated in breast cancer progression.On this basis, we also want to explore the relationship between the Flt-1 and its associated miRNAs and breast cancer prognosis and treatment by clinical data.These studies will help us clarify breast cancer metastasis and angiogenesis process, and provide a new experimental evidence and a new potential target for breast cancer .

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，其死因主要是转移和复发。文献报道血管内皮生长因子受体Flt-1表达水平与乳腺癌转移和复发密切相关，但Flt-1在乳腺癌中的功能和作用机制目前还不清楚。在上一个自然基金项目资助下我们证实了miR-10b能够抑制Flt-1的mRNA和蛋白表达；低氧刺激能够促进Flt-1的表达，且miRNAs参与了这一过程。这为Flt-1的功能研究提供了新的线索。本项目拟研究和验证调节Flt-1表达的miRNA分子；阐明低氧环境下miRNAs对Flt-1的调控作用机制，揭示Flt-1对乳腺癌转移和血管生成的影响的机制。在此基础上结合临床资料，探讨Flt-1及其相关的miRNAs与乳腺癌预后和治疗的关系。这些研究将有助于阐明乳腺癌转移和血管生成机制，为乳腺癌的诊断和治疗提供新的实验依据和新的靶点，具有潜在的临床应用价值。

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，其死因主要是转移和复发。血管生成是乳腺癌转移和复发的重要环节之一。非编码RNA(non-coding, ncRNA)是不参与蛋白质编码的RNA的总称，包括微小RNA(miRNA)、长链非编码RNA(lncRNA)、转运RNA(tRNA)、核糖体RNA(rRNA)等。越来越多的证据表明， ncRNA与乳腺癌的发生发展密切相关，异常的ncRNA可能在乳腺癌发生中发挥抑制或促进作用，但ncRNA在乳腺癌中的功能和作用机制目前还不清楚。研究表明Flt-1 的表达水平与乳腺癌转移和复发密切相关，但Flt-1 在乳腺癌中的具体功能和作用机制还不清楚。本项目筛选调节Flt-1表达的具体miRNA分子，研究低氧环境下miRNA对Flt-1的调控作用机制；通过体内外的乳腺癌转移和血管生成模型、分子生物学及细胞学等手段，研究Flt-1在乳腺癌发生发展中的作用及其机制，以期寻找其上下游的关键蛋白及miRNAs分子；并在此基础上结合临床资料来探讨Flt-1及其相关的miRNAs与乳腺癌预后和治疗的关系。结果表明miR-10b、 miR-200、miR-372能够调控Flt-1的表达。过表达Flt-1后流式细胞仪检测细胞周期发现S期细胞数量增多，沉默Flt-1的表达后，乳腺癌细胞迁移能力受到了抑制。乳腺癌组织中Flt-1表达明显增多，且与肿瘤级别有关。乳腺癌组织与正常组织相比较，HIF-a表达增多，但与肿瘤级别没有相关性。乳腺癌组织中Ki67表达Flt-1无关，与HIF-a 有关。这些为乳腺癌的血管生成和转移研究提供了线索。另一方面，最近研究发现长非编码RNA (lncRNAs)在肿瘤生物学中发挥着至关重要的作用。然而它们在乳腺癌发病和转移复发机理中的作用还不清楚。本研究中我们调查了乳腺癌中 lncRNAs的表达谱，结果发现了1758 lncRNAs和1254 mRNA有差异表达(≥2倍变化)。通过KEGG pathway分析探讨潜在lncRNAs功能，发现包括微管活动和DNA复制等pathway与表达谱密切相关。我们的研究结果揭示lncRNAs在乳腺癌中的表达情况，为探索乳腺癌潜在的治疗目标提供了有用的信息。