MYD88基因多态性与幽门螺杆菌感染贲门癌的发生与致病机制研究

Helicobacter pylori(Hp) is classified by the IARC as Group 1 carcinogens. Hp is proved to cause distal gastric cancer(DGC). It is found that epidemiology and pathogenesis are different between gastric cardia cancer (GCC) and distal gastric cancer. The association between Hp and gastric cardia cancer remains controversial. Chaoshan area in southern China is a coastal GCC high-risk area. We previously found the genetic susceptibility plays a role in the carcinogenesis of GCC and Hp infection was significantly higher in GCC comparing with that in healthy group. We also found that the GCC patients had MYD88 gene polymorphism which has been never reported before. We speculate that Hp infection and MYD88 gene polymorphism may play an important role in the carcinogenesis of GCC. Basing on our previous study we will carry out a large-scale case-control Sequencing study to explore the relationship of the polymorphisms and GCC patients with Hp infection. Also, we will try systematic study, including in vitro and in vivo，to reveal the interaction between polymorphisms and Hp infection. It may provide a new thoughts and research basis for the diagnosis and treatment of GCC patients.

幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，Hp）被世界卫生组织列为Ⅰ类致癌原，是远端胃癌的病因之一。贲门癌的流行病学和发病原因与远端胃癌不同，Hp感染与贲门癌的关系尚存争议。潮汕乃罕见的沿海贲门癌高发区，我们前期研究认为遗传易感与潮汕贲门癌的发生密切相关，检测患者血样首次发现Hp感染识别受体TLR4信号通路的重要基因MYD88存在尚未报道过的错义突变，且潮汕贲门癌患者Hp感染率显著高于对照人群,我们推测MYD88基因多态性与幽门螺杆菌感染可能在潮汕贲门癌的发生中起重要的作用。本项目拟通过对贲门癌患者和健康对照的生物样本MYD88基因测序和蛋白表达检测，分析候选基因变异与贲门癌易感性、蛋白表达和癌变进程的关系；通过体内外实验明晰感染与候选基因变异的相互作用，为Hp感染贲门癌患者的诊治提供新思路和研究基础。

贲门癌的流行病学和发病原因与远端胃癌不同。我们前期研究认为幽门螺杆菌( Helicobacter pylori,Hp)感染识别受体信号通路的重要基因MYD88与贲门癌的发生相关。通过对贲门癌患者和对照生物样本MYD88基因外显子测序、甲基化水平和蛋白表达检测以及Hp感染的检测，分析Hp感染、MYD88基因异常与贲门癌发生的关系。研究结果显示MYD88蛋白在贲门正常黏膜上皮、炎症组织和癌组织中表达逐渐增强。NF-КB P50/105在癌组织中与MYD88蛋白的表达呈正相关。Hp感染阳性的病例组织中，MYD88蛋白表达强于Hp 感染阴性的组织，但没有统计学意义。MYD88蛋白表达与肿瘤的分化程度相关。对Hp感染阳性的贲门癌病例和对照血样MYD88基因外显子区进行测序，在MYD88 1号和 3号外显子区发现突变位点，但与贲门癌的发生无关。利用全基因组DNA甲基化芯片对8例贲门癌-癌旁配对组织进行检测。分析结果表明贲门癌组织的DNA甲基化状态明显不同于癌旁黏膜组织，且癌组织间的DNA甲基化状态存在一定程度的异质性。进一步对有效探针的DNA甲基化水平进行分析，结果显示与癌旁黏膜组织相比，贲门癌组织中DNA甲基化水平发生显著性差异改变。分析结果示MYD88基因未发现有差异甲基化位点。MYD88细胞增殖实验结果表明，MYD88基因敲降组细胞增殖倍数较对照组细胞明显降低,具有统计学意义。划痕实验结果表明，MYD88基因敲降组细胞迁移率小于对照组，但差异无统计学意义。细胞与细菌共培养的结果显示Hp可以刺激MYD88 RNA表达水平升高。本项目实验结果提示Hp感染与MYD88基因存在相互作用，MYD88蛋白表达异常可能与贲门癌的发生相关，基因组甲基化水平的异常可能与贲门癌的发生相关，为贲门癌患者的诊治提供新的研究思路和基础。