EBV劫持Dicer基因建立II型潜伏感染并促进鼻咽癌细胞EMT和转移

鼻咽癌高发于华南地区且是好发转移的恶性肿瘤,EBV感染与鼻咽癌的发生发展密切相关。EBV在NPC中的表达高丰度的miRNA，其功能不清楚。我们前期研究了EBV编码的miRNA组的特征表达谱，同时发现dicer在NPC细胞株及组织中呈低表达且与病人预后相关；初步发现ebv-miR-BART6/Dicer/miR-200/ZEB/BZLF1和E-cadherin调节通路在EBV潜伏感染及NPC的EMT的交互调控关系。本项目主要研究EBV是如何在表观遗传学水平劫持人的Dicer基因来调控人的miR-200家族水平，进而影响EMT诱导转录因子ZEB最终达到建立潜伏感染及促进宿主细胞癌变转移的目的。本项目拟建立一个NPC发生发展的EMT及转移的细胞模型，利用该模型来研究EBV的miRNA分子在诱导细胞EMT和肿瘤干细胞过程中的分子机制，为筛选NPC转移诊断标志物及发现NPC转移治疗靶点提供理论基础。

鼻咽癌高发于华南地区且是好发转移的恶性肿瘤, EBV感染与鼻咽癌的发生发展密切相关，肿瘤干细胞是肿瘤启动、发生与发展的细胞生物学基础，同时也是肿瘤治疗抗性、复发及转移的基础。EBV在NPC中的表达高丰度的miRNA及潜伏病毒癌基因LMP1，其功能（特别是与肿瘤干细胞的相关性）不清楚。本项目主要研究了在不同感染类型的肿瘤细胞中EBV编码的miRNA组的表达谱特征，同时主要研究病毒潜伏癌基因LMP1与NPC的癌变的相关性，特别是与NPC的放化疗抗性及诱导NPC干细胞的调控机制，为靶向逆转治疗抗性及靶向NPC干细胞治疗提供分子基础。. 本项目有以下几个重要的发现与结果：1）我们建立了三种EBV潜伏感染状态下的EBV编码的miRNA的特征性表达谱，特别是是发现EBV在II型潜伏感染状态下NPC的miRNA特征表达谱,为进一步深入研究EBV的miRNA的功能奠定基础，同时我们也为经典的EBV潜伏感染分类增加非编码病毒基因的标志物，为更加正确分类潜伏类型奠定基础；2）本项目还发现了EBV的潜伏膜蛋白基因LMP1调控人的miRNA-21，抑制人的凋亡诱导基因FAS及PDCD4导致NPC细胞对顺铂的化疗抗性；3）本项目还发现EBV的LMP1癌基因诱导CD44阳性NPC干细胞特征导致放疗抗性，其分子机制可能是通过抑制干细胞中的射线损伤诱导的p53介导的凋亡信号通路；4）最重要的是本项目首次发现EBV的LMP1癌基因劫持人的miRNA-21/PTEN/AKT自动调节环，通过正反馈调节环方式激活PI3K/AKT信号通路，维持NPC干细胞的干性特征。. 以上重要重要发现具有理论及临床意义，首先确定EBV潜伏感染的新标志物EBV编码的miRNA是可以作为病毒潜伏感染的标志物的，同时也提示EBV-mi-BART家族分子在NPC的病变过程中的重要作用；其次，本项目发现EBV基因与NPC细胞放化疗抗性新的分子机制，为临床逆转NPC的治疗抗性奠定理论基础，第三，最重要的是本项目发现EBV诱导NPC细胞干性的分子机制，为将来临床靶向干细胞治疗提供分子靶点。. 总之，本项目提示EBV外源因素是可以诱导并维持宿主细胞的干细胞特点的，为进一步研究EBV对感染宿主细胞的重新编程奠定基础，我们应用肿瘤干细胞理论来研究并解释NPC细胞的放化疗抗性及EMT和转移的表型特征，具有转化医学的意义。