基于HIV-1整合酶及其与宿主细胞蛋白 LEDGF/p75相互作用的先导化合物发现

HIV-1整合酶(IN)是HIV-1基因表达和复制所必须的酶，而且宿主细胞内不存在该酶的类似物, 因此是设计高效、低毒抗HIV药物的理想靶点。HIV-1整合前复合体(PIC)转运至细胞核内是HIV-1整合到宿主细胞的关键步骤。HIV-1IN具有亲核性, 在PIC入核中起主要作用。研究发现，LEDGF/p75 蛋白是HIV-1 IN入核过程中不可缺少的细胞辅助因子，可作为HIV治疗的新靶点。因而，寻找抑制HIV-1IN和LEDGF/p75相互作用的化合物，是抗HIV药物研究的新方向。本研究拟在前期工作基础上建立高通量和高灵敏度的HIV-1整合酶抑制剂及其入核抑制剂筛选方法,结合分子对接技术研究化合物与HIV-1 整合酶和LEDGF/p75的作用位点,建立起以HIV-1整合酶及其与LEDGF/p75 相互作用为靶点的化合物筛选平台，并筛选出一批新型化合物,为艾滋病的药物治疗提供理论和实验依据。

HIV-1整合酶(IN)是HIV-1基因表达和复制所必须的酶，而宿主细胞内不存在该酶的类似物。整合酶是高效、低毒抗HIV药物的理想靶点。IN在HIV-1整合前复合体(PIC)入核过程中起着极其重要的作用。LEDGF/p75蛋白是HIV-1 IN入核过程中不可缺少的细胞辅助因子，可作为HIV-1治疗的新靶点。IN入核后，发挥其3’端加工活性和链转移活性，将HIV-1基因组DNA整合到细胞基因组中，形成前病毒感染。通过本项目的研究，我们将野生型HIV-1整合酶片段克隆到表达载体pEGFP-C1上，构建了pEGFP-C1-IN质粒，成功地建立了筛选基于HIV-1 IN和LEDGF/p75相互作用的整合酶入核抑制剂筛选研究方法。同时，利用荧光共振能量转移技术成功地建立了整合酶3’端加工抑制剂的筛选和研究方法，还通过ELISA和化学发光结合的方法建立了整合酶链转移抑制剂筛选方法。在此基础上，采用建立的方法，筛选了400多个化合物，发现了一批HIV-1整合酶抑制剂。发现了LZ-43等5个化合物是整合酶3’端加工的抑制剂。分子对接发现11个化合物可抑制HIV-1整合酶与LEDGF/p75的相互作用。在J Med Chem、PLoS One、Carbohydr Res、Arch Pharm Res等刊物发表标注课题号(81102483)论文15篇，其中SCI收录论文13篇。