EBI3在子痫前期中的作用及免疫相关机制的研究

Preeclampsia is characterized by the presence of elevated blood pressures and proteinuria after 20 weeks of gestation or organ dysfunction as the main manifestation of the multiple system syndrome. It is a major cause of maternal and fetal morbidity and mortality worldwide. So far, the pathogenesis of preeclampsia is not clearly clarified, a growing body of evidence shows that the occurrence of preeclampsia is associated with Th17 predominance.Our previous experimental results found EBI3 protective expression in placenta of patients with preeclampsia, and EBI3 can inhibit Th17 cell differentiation in rheumatoid arthritis and reduce their autoimmune response, so we assume that in preeclampsia EBI3 by inhibiting Th17 cell differentiation reconstruction of maternal-fetal tolerance. To test this hypothesis, the preeclampsia mice model was established and EBI3 protein was given to the preeclampsia mice model in the different stages of preeclampsia. Using flow cytometry, enzyme-linked immunosorbent assay and immunohistochemical method, from the overall level of the molecules, cells, tissues, animals and other aspects we explore the role of EBI3 in preeclampsia and clarify the regulation mechanism of EBI3 inducing immune tolerance by inhibiting Th17 cell differentiation in preeclampsia mouse model. This study will reveal the mechanism of EBI3 immune tolerance reconstruction in preeclampsia from a new point of view and provide new ideas for the immune prevention and treatment of preeclampsia.

子痫前期是妊娠20 周以后出现的高血压和蛋白尿或器官功能障碍为主要表现的多系统综合征，是导致围产期母儿严重并发症和死亡率增高的重要原因之一。目前认为Thl7增加与子痫前期发病相关，我们前期的实验结果发现在子痫前期患者胎盘中EBI3保护性表达增加，而EBI3可以通过抑制Th17细胞分化在类风湿性关节炎减轻自身免疫反应，因此我们假设在子痫前期EBI3通过抑制Th17细胞分化重建母胎耐受。为了验证这一假说，我们建立了子痫前期小鼠模型，在子痫前期的不同阶段给予EBI3蛋白治疗，采用流式细胞术、酶联免疫吸附测定、免疫组化等手段，从分子、细胞、组织以及动物整体水平等多方面探讨EBI3在子痫前期中的作用，明确EBI3通过抑制Th17细胞分化对子痫前期小鼠模型免疫耐受的调节机制。本研究将从EBI3这个新视点为揭示子痫前期的免疫耐受重建机制奠定基础，为子痫前期的免疫防治提供新思路。

成功的妊娠类似于同种异体移植免疫耐受的过程。越来越多的证据表明，子痫前期的发生与母胎界面免疫耐受失衡有关。EB 病毒诱导基因3（Epstein-Barr virus induced gene 3，EBI3）是近年来发现的在免疫调控中起重要作用的蛋白，已经逐渐成为人们在免疫耐受研究中的热点。在我们的研究中发现在子痫前期胎盘蜕膜中EBI3有更高蛋白表达与正常妊娠的孕妇相比。因此EBI3可能参与到子痫前期的发生发展过程中。为了进一步筛选与EBI3相关的信号通路蛋白，我们应用蛋白质通路芯片（Protein Pathway Array，PPA）技术对子痫前期胎盘组织进行差异蛋白质表达的筛选，并随即在这些差异表达的蛋白质中选择部分相关的蛋白质，应用Luminex技术检测这些蛋白质在子痫前期患者血清中的表达并加以分析，发现VEGF，sEndoglin，sFlt-1显著增高，COX-2，PLGF，NGAL，sEGFR显著降低。子痫前期组中sEGFR显著降低，sEGFR水平可能作为的子痫前期发病风险独立预测因子，为进一步研究子痫前期病理生理学机制奠定基础，同时也为子痫前期风险的评估提供依据。髓系来源抑制细胞（myeloid derived suppressor cell, MDSC）是由髓系造血干细胞在感染、肿瘤、自身免疫性疾病、慢性炎症和创伤等情况下分化发育而成，具有明显的异质性，通过多种机制发挥免疫抑制作用。有研究表明MDSC 在正常妊娠的孕产妇外周血和脐带血中比率均有增高，提示MDSC 可能在妊娠期母胎耐受的维持中发挥重要的免疫抑制功能。我们的研究结果显示在正常妊娠母体及胎儿血液循环中总MDSC 及其两个亚群的比率均有显著增高，提示MDSC 可能在正常妊娠母胎耐受状态的维持中起作用。而且发现子痫前期患者母体及胎儿血液循环中总MDSC 及G-MDSC 比例降低，而M-MDSC 比例与正常妊娠无差别，提示在子痫前期的病理过程中，可能是G-MDSC 的改变起到关键作用。