微管结合蛋白EB1磷酸化的调控及功能研究

EB1是微管动态性关键调控蛋白，参与很多细胞活动，与肿瘤的发生密切相关。EB1磷酸化对其功能的发挥十分重要，但是关键的激酶、磷酸化位点以及EB1磷酸化发挥的具体作用等尚不清楚。在本项目中，我们将在前期工作的基础上，证实ASK1对EB1的磷酸化并鉴定影响EB1磷酸化的其它因素；探讨EB1被磷酸化后在微管动态性调控中的功能如何改变并剖析相应机理；研究EB1磷酸化在细胞分裂和迁移中的功能及相应机制，并探讨ASK1在微管动态性、细胞分裂和迁移中发挥的作用。我们还将探讨在胰腺癌中ASK1高表达与EB1磷酸化水平升高的相关性，并研究ASK1介导的EB1磷酸化在胰腺癌细胞增殖、迁移和侵袭及肿瘤生长转移中如何发挥作用等。这些研究不仅有助于加深对EB1磷酸化调控的理解，发现ASK1的新功能，促进对细胞活动基本规律的认识，也有助于深入了解胰腺癌的发病机制，为该病的诊断和治疗提供新的理论依据。

EB1是微管动态性关键调控蛋白，参与细胞分裂、细胞迁移等很多细胞活动，与肿瘤的发生密切相关。但是，EB1磷酸化调控的分子机制及其在细胞活动中的功能尚不清楚。在本项目中，我们探讨了ASK1对EB1的磷酸化，鉴定了调节EB1磷酸化的其它因素，研究了EB1磷酸化对微管动态性的调节及其在细胞分裂和细胞迁移中的作用，并分析了EB1磷酸化在胰腺癌发生发展中的作用。我们的研究发现在细胞内EB1的磷酸化受到精密的调控，这对于EB1调节微管动态性以及微管相关的细胞活动十分重要。我们的研究还发现EB1磷酸化调控的异常可能与肿瘤的发生相关。我们的代表性成果包括：ASK1在胰腺癌发生中发挥重要作用，在细胞分裂时通过磷酸化EB1来稳定星体微管，从而调节纺锤体的定向和定位；Src也能够磷酸化EB1，通过调节微管与黏着斑的相互作用，促进细胞迁移；EB1与去泛素化酶CYLD相互作用，二者协同调控微管动态性及细胞迁移；微管/EB1相关蛋白CYLD可以调控纤毛发生、纺锤体定向以及微管抑制剂的活性。这些发现促进了对细胞分裂、细胞迁移等微管相关的细胞活动的认识，也为理解微管异常相关人类疾病的病因提供了新的理论知识。