基于抗体的针对登革病毒多肽疫苗的构建

迄今为止，登革病毒致病机理和人体免疫防御机制不明，仍没有安全有效的疫苗。与传统疫苗相比，合成肽疫苗具有免疫背景明确、稳定、纯度高、易于获得、批间差异极小、无毒副作用等优点，是目前预防和控制感染性疾病和恶性肿瘤的一种新型疫苗。基于既往研究结果，本课题拟对我们前期制备的具有保护作用的抗登革2型病毒的单克隆抗体进一步研究。用噬菌体肽库技术鉴定其抗原表位，再与其它三个血清型的登革病毒氨基酸序列比对，鉴定其它血清型的表位，合成抗原肽，连接到多聚赖氨酸骨架上，形成针对登革病毒的四价抗原肽疫苗。然后对疫苗进行评价，以期得到具有保护作用的疫苗，为后续研究登革病毒的致病机理及预防治疗性药物的研发奠定基础。

迄今为止，登革病毒(dengue virus，DV)致病机理和人体免疫防御机制不明，仍没有安全有效的疫苗。与传统疫苗相比，合成肽疫苗具有免疫背景明确、稳定、纯度高、易于获得、批间差异极小、无毒副作用等优点，是目前预防和控制感染性疾病和恶性肿瘤的一种新型疫苗。基于既往研究结果，本课题拟对我们前期制备的具有保护作用的抗DV2病毒的单克隆抗体进一步研究。我们纯化制备了78#, 1E7, 和8F12三株杂交瘤所分泌的抗体，并简单分析了其生物学特性。78#, 1E7, 和8F12均有一定的中和病毒的能力，其中78#和8F12联用具有一定的动物保护作用。与此同时，我们还对前期制备的另一株抗登革病毒NS3蛋白的单抗4F5进行了抗原表位的鉴定，采用噬菌体肽库技术鉴定其抗原表位位于NS3蛋白的460-469位氨基酸，表位肽免疫动物得到高浓度的特异性的抗DV2抗血清。研究发现该表位与其它三个血清型的登革病毒氨基酸序列比对发现具有高度保守性，对登革病毒的四价抗原肽疫苗的构建提供很好的基础，为后续研究登革病毒的致病机理及预防治疗性药物的研发奠定基础。通过本项目的研究，发表SCI论文1篇，申请国家发明专利1项。