c-myc基因特异性核酶抑制血管平滑肌细胞增殖的研究

计算机分析c-myc基因mRNA的二级结构，选出第2019、2029、2036位三个位点，设计相应的锤头状核酶。选择第2029位核酶，化学合成其基因；构建核酶和靶RNA体外转录载体，体外转录核酶可有效切割靶RNA，切割率约64%。构建核酶真核表达载体并在脂质体介导下转染培养大鼠血管平滑肌细胞，斑点杂交显示核酶在细胞内表达；转染细胞Myc蛋白表达明显降低，抑制率为43.4%；细胞生长速度明显减慢；流式细胞仪分析，细胞G0/G1期增加29.4%、S期和G2/M期减少53.9%和26.9%。在大鼠颈动脉球囊损伤模型，核酶真核表达载体转染后，内膜/中层面积比降低约47%。表明c-myc基因mRNA核酶对培养血管平滑肌细胞增殖及血管成形术后血管内膜增生均有明显抑制作用。