炎症调控PCSK9介导的儿童原发性肾病综合征肾脏内脂质沉积的机制研究

儿童原发性肾病综合征（PNS）发生肾硬化时常伴有肾组织内炎症因子表达升高、脂质沉积增加，其机制尚不清楚。本课题组已证实：炎症因子通过促进肾固有细胞LDLr的表达，造成其泡沫化。.PCSK9是介导LDLr降解的关键蛋白，转录因子HNF1α通过与PCSK9基因启动区HNF1位点结合、促进其转录。本课题组研究发现：儿童PNS发生肾硬化时，其肾组织内HNF1α、PCSK9的表达明显降低；且HNF1α、PCSK9的表达与炎症因子的表达呈负相关。因此我们推测：炎症因子可能通过下调肾脏固有细胞内HNF-1α的表达，减少其与PCSK9启动区HNF1位点结合，从而降低PCSK9的表达，减少LDLr的降解？.本项目拟采用肾系膜细胞进行体外实验，阿霉素肾病小鼠进行体内实验，研究炎症是否通过干扰HNF1α-PCSK9-LDLr通路引起肾脏固有细胞泡沫化，以新的视角探讨炎症加重儿童PNS肾脏内脂质沉积的分子机制。

1、阿霉素肾病小鼠模型和慢性炎症模型构建成功。阿霉素小鼠肾病模型早期病理改变为微小病变，随着病程迁延，逐步出现局灶节段性肾小球硬化，伴肾功能不全。.2、在有肾脏病理改变和高脂血症的情况下，炎症能够加重肾脏病变；单纯炎症不影响肾脏病理结构和功能。随着炎症程度增加，肾组织内胆固醇含量明显增高，炎症程度越重，发展为肾功能不全和肾小球硬化的时间越短。.3、随着炎症的逐步加重，SREBP2表达逐步增加，HNF-1α和PCSK9表达逐渐下降，脂质沉积增加，提示肾脏局部炎症反应可能能够通过下调HNF-1α，最终减少PCSK9表达，LDLr降解减少，增加肾脏内脂质沉积。.4、建立建立HNF-1α敲除的人肾系膜细胞系，为后续实验做好准备