转蜘蛛spidroin1和AvSF1基因绵羊早期克隆胚的研究
基本信息
批准号：30771538
项目类别：面上项目
资助金额：27.00
负责人：安铁洙
学科分类：
依托单位：东北林业大学
批准年份：2007
结题年份：2010
起止时间：2008-01-01 - 2010-12-31
项目状态： 已结题
项目参与者：王春生,梁洋,朴善花,刘欣,张秋婷,罗芳
关键词：
启动子蜘蛛丝蛋白基因载体构建重构胚细胞系
结项摘要
在前期工作中，已经获得了蜘蛛丝蛋白spidroin1和AvSF1基因的核心序列，同时克隆和筛选到在绵羊成纤维细胞中具有表达活性的角蛋白结合蛋白启动子"KAP6.1"和B2C，并利用这两个启动子构建了可在绵羊皮肤成纤维细胞中特异表达的载体。本项目拟利用绵羊自身产生角蛋白的特性，采用LacZ作为报告基因，检测已克隆的角蛋白启动子"K2.10"、K5、K17和角蛋白结合蛋白启动子"KAP6.1"、B2A及B2C的表达活性，筛选毛囊中高表达活性的启动子，并连接到pcDNA3.1载体上；将多聚化的蜘蛛丝基因核心序列spidroin1和AvSF1分别连接到已筛选的含有被毛特异表达启动子的pcDNA3.1载体上；采用脂质体介导法转染绵羊成纤维细胞，用选择培养基、PCR和Southern杂交等方法筛选整合细胞，传代培养和保存；采用常规的绵羊核移植技术获得重构胚，以探索利用转基因绵羊开发蜘蛛丝蛋白的新途径。
项目摘要
项目成果
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数据更新时间：2023-05-31
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