累积电针对慢性神经痛大鼠脊髓星形胶质细胞作用的研究

The spinal cord is an important part of the central regulation of acupuncture analgesia. Astrocytes are the most predominant glia in the mammalian central neural system(CNS). Recent studies have demonstrated that astroytes are implicated in the spinal nociceptive processing, and may be involved in the maintenance of neuropathic pain.. The present study aims to investigate the roles of astrocytes in the repeated electroacupuncture(EA) in the spinal dorsal horn ,so as to reveal its underlying mechanism in cumulative acupuncture analgesia..Chronic neuropathic pain model(chronic constrictive injury,CCI) is established by ligature of the unilateral sciatic nerve with surgical suture. EA (2/15Hz, 1mA) was applied to bilateral ST36-GB34 for 30 min, once daily for 2 days and 2 weeks respectively. The thermal pain threshold (PT) of the bilateral paw was detected the next day morning after EA. Tetanically sciatic stimulation can induce spinal long-term potentiation (LTP) of C-fiber evoked field potentials in the spinal dorsal horn. The morphological changes of astrocytes after CCI and EA are observed by electron microscopy. The expression ofIL-1β，IL-6，TNF-αand neurotrophic factor are detected by molecular biology.

脊髓是针刺镇痛调控中枢的重要组成部分,是初步对针刺镇痛处理、译释的第一站。星形胶质细胞是中枢神经系统最主要的胶质细胞，近期研究表明参与神经病理痛的维持，参与脊髓伤害性信息的处理。本研究拟采用电生理、电镜学、免疫组织化学、分子生物学等技术，在结扎大鼠坐骨神经造成慢性痛的模型上，以星形胶质细胞为切入点，观察反复电针对动物的行为学反应，脊髓背角突触可塑性，星形胶质细胞形态的改变，及各种致痛因子及神经营养因子的影响，以研究重复电针对脊髓背角星形胶质细胞的影响，以探讨针刺累积效应的机理。

脊髓背角是伤害性信息传入通路的第一级中转站，是机体对于伤害性信息进行自身调制或整合的重要位点之一，是疼痛刺激调节的关键部位。星形胶质细胞（astrocyte)是中枢神经系统中重要的胶质细胞(占胶质细胞的20%-40%），除对神经元的营养支持、修复之外，还能对神经元的突触传递产生影响 ,在维持神经病理性疼痛过程中有重要作用。本研究通过观察重复电针对慢性病理性疼痛(CCI，chronic constrictive injury)大鼠痛行为的影响，对CCI大鼠脊髓背角星形胶质细胞活性及其释放的致痛物质和神经营养因子，脑源神经营养因子等的影响，以及对脊髓突触可塑性变化的影响，来分析电针镇痛与星形胶质细胞可能的机制。结果显示电针“足三里”-“阳陵泉”可以改善大鼠的坐骨神经痛，且电针2周组镇痛效果明显优于电针2天组，电针镇痛具有明显的累积效应；慢性神经痛可以激活星形胶质细胞，胞体变粗，突起发生增粗，P物质在脊髓一层表达明显增多，且与星形胶质细胞激活的部位吻合，两次电针并不能明显影响星形胶质细胞的活性，多次电针才可明显抑制星形胶质细胞激活的状态，抑制SP的表达。神经痛模型使BDNF,NT-3，NT-4以及IL-1βm RNA,TNFαmRNA,IL-6mRNA的表达增多，电针2天，除IL-1βmRNA和NT3有明显的下调，其他都无明显改变，电针1周， IL-1βmRNA， TNF-αmRNA ，NT3/4都有明显的下调，在电针2周时，BDNF,IL-6mRNA有明显下调。电针镇痛可以引起了与胶质细胞关系密切的BDNF、NT-3/4在脊髓的明显下调，与NGF的关系不密切。慢性神经痛可以降低引起的C-纤维诱发场电位的阈值，并升高C-纤维诱发的场电位波幅。 两次电针即可抑制LTP，多次电针可提高引起的C-纤维诱发的场电位阈值，并阻碍脊髓背角LTP的形成。 胶质细胞抑制剂抑制了LTP的形成，胶质细胞参与脊髓LTP的形成。本研究通过行为学、电生理学及分子生物学技术揭示重复电针后CCI动物脊髓背角突触可塑性变化、星形胶质细胞及其释放各种相关的蛋白的变化，为针刺镇痛的累积效应的机制研究提供了新的思路，为临床针刺镇痛治疗疗程方面提供理论依据。