调节骨内P-gp活性对激素性股骨头坏死的影响及其分子机理

激素性股骨头坏死是临床亟待解决难题，发病机理不清。我们前期研究发现口服利福平调节P-gp活性显著影响激素性坏死发生，但骨内P-gp与肝脏细胞色素P-450在坏死中的作用价值无法明确，本项目对此进一步研究，探讨局部靶向调节骨内P-gp活性在激素性坏死中的应用价值及其作用的分子机理。.建立大白兔激素性股骨头坏死模型，观察不同给药途径对骨内P-gp活性和肝脏细胞色素P-450的影响，研究骨小梁结构改变以及PPAR、OPG/RANKL基因表达与骨内P-gp活性变化的相关性，明确局部调节骨内P-gp活性的价值；利用成骨细胞/破骨细胞共培养模型，通过调节细胞P-gp活性，改变细胞内激素水平，检测成骨细胞、破骨细胞PPAR、OPG/RANKL表达的改变，观察阻断PPAR或OPG/RANKL对细胞增殖分化与功能的影响，阐明分子机理，以期探索一种预防激素性坏死的新途径。

激素性骨股骨头坏死是临床亟待解决的问题，为非创伤性骨坏死首位。围绕P-gp活性不同骨坏死易感性存在差异问题。本研究通过体外和体内实验观察了P-gp活性与激素性骨坏死的关系。结果发现：（1）口服及肌注利福平均可引起外周P-gp和肝脏CYP450升高，骨内局部缓释利福平则仅改变骨内P-gp活性；（2）局部上调骨内P-gp可以抑制骨坏死发生；（3）在体外成骨、破骨和骨髓间充质干细胞等实验中，P-gp促进剂利福平可以拮抗激素诱导的成骨抑制、破骨形成和成脂等现象；（4）在成骨细胞激素负荷实验中，P-gp促进剂和抑制剂均发挥了拮抗作用，该作用可能通过降低细胞内ROS水平来抑制地塞米松诱导的NF-κB激活、ERK以及JNK的磷酸化。（5）利福平拮抗激素诱导的细胞坏死可能通过上调miR34a水平，进而引起细胞自噬降低，起到保护作用。