热休克蛋白90及其他相关分子在日本脑炎病毒感染中的作用研究

日本脑炎病毒（JEV）属于蚊传黄病毒，引起流行性乙型脑炎，严重威胁人类的生命健康，其发病机制尚未完全阐明。研究表明，JEV是经受体介导、网格蛋白依赖的胞吞作用通过细胞膜上的脂筏进入细胞引起感染，但其受体分子及其在感染中的作用仍未明确。本课题组前期在国家自然科学基金的资助下，已初步证明热休克蛋白90（HSP90）是Vero细胞上的JEV特异结合分子。HSP90是细胞内重要的分子伴侣，高度保守，存在于所有真核细胞。而JEV具有特异的细胞嗜性，且HSP90抗体只能部分阻断JEV的感染。因此，认为除HSP90之外，很可能存在其它尚未发现的（辅）受体分子，与HSP90共同介导JEV入胞。本课题拟以HSP90为切入点，综合运用多种方法分离其它可与JEV 特异结合的分子，确定其受体功能，并进一步研究其与HSP90在JEV入胞及感染过程中的作用，为最终阐明JEV感染细胞的分子机制奠定扎实的实验基础。

日本脑炎病毒（JEV）属于蚊传黄病毒，引起流行性乙型脑炎，严重威胁人类的生命健康，其发病机制尚未完全阐明。研究表明，JEV 是经受体介导、网格蛋白依赖的胞吞作用通过细胞膜上的脂筏进入细胞引起感染，但其受体分子及其在感染中的作用仍未明确。本研究通过免疫共沉淀分离到vero细胞膜上多个与JEV结合的蛋白条带，通过质谱分析和数据库搜索，结合体外结合实验可以初步确认其中的92kD分子是HSP90β蛋白，抗-HSP90β单克隆抗体阻断实验和共定位实验进一步证明，HSP90β参与了JEV对vero细胞的吸附结合。我们还用JEV攻击HSP90β蛋白表达量被敲低的vero细胞，检测PI3K/AKT信号通路相关分子，结果发现敲低HSP90β在Vero细胞中的表达，会降低JEV在激活PI3K/AKT信号通路中的作用。以上研究为我们进一步研究HSP90β和JEV E蛋白之间的相互作用和其在JEV入胞信号转导过程中的作用提供了线索和实验基础。