内皮细胞通过TAM-Gas6/蛋白S调控血小板微粒清除在减压病血管内皮损伤中的作用及机制研究

The prevention and treatment of decompression sickness (DCS) has become the core problem in diving medical support, and endothelial dysfunction caused by intravascular bubbles plays a key role in the development of DCS. However, endothelial injury persists after the disappearance of bubbles, suggesting that there are other factors contributed to endothelial injury in DCS. Platelet-derived microparticles (PMP) are a kind of microvesicles secreted by platelets after activation, which play an important role in regulation of coagulation, inflammation and endothelial function. Our previous study found that the number of PMP increased rapidly after DCS, but returned to basic levels within hours, suggesting a rapid and effective clearance in the body. Endothelium can mediate PMP into the cytoplasm via endocytosis and tyrosine kinase receptor family TAM participated in this process. We hypothesized that this receptor-ligand interaction may play a key role in PMP clearance, which may be the core regulator of endothelial injury after disappearance of bubbles. This research project intends to define the role of platelet activation in DCS, study the biological effects of bubble-induced PMP on endothelium, explore the mechanisms of TAM in PMP clearance by endothelium and find the corresponding intervention measures, thus providing new targets and strategies for the prevention and treatment of DCS.

减压病（DCS）防治是潜水医学保障的核心，血管内气泡导致的内皮损伤在其发生发展中起到关键作用，但气泡消失后内皮损伤持续存在，提示可能存在其他损伤因素。血小板微粒（PMP）是血小板激活后分泌的一种囊性小泡，在凝血、炎症及内皮功能调节中均发挥重要作用。我们发现，DCS发生后循环PMP数量骤增，但在数小时内可恢复至正常水平，提示体内存在快速、有效的清除机制。内皮细胞可通过酪氨酸激酶受体家族TAM经胞吞作用介导PMP进入胞内，我们推测这种受-配体之间的相互作用可能在PMP清除过程中发挥关键作用，并对内皮持续损伤起到核心调控作用。本研究拟明确血小板激活在DCS中的作用，论证气泡诱导的PMP对内皮细胞的生物学效应，探讨TAM在内皮介导的PMP清除中的调控机制并寻找相应的干预措施，从而为DCS的防治提供新靶点与新策略。

减压病防治是潜水医学保障的核心医学问题。随着我国大洋战略逐步走向深蓝，潜水作业的频次、深度及风险不断加大，这对潜水医学保障提出了更高的要求。深入阐明DCS发病机制，寻找积极有效的防治措施具有迫切的现实意义和广阔的军事应用前景。血小板微粒（PMP）是血小板激活时分泌的一种囊性小泡，且在凝血、炎症及内皮功能调节中均发挥重要作用。DCS发生后循环PMP数量骤增，但在数小时内可恢复至正常水平，提示体内存在快速、有效的清除机制。内皮细胞含有完整的酪氨酸激酶受体家族TAM（Tyro3，Axl，Mer）及其配体，我们推测这种受-配体之间的相互作用可能在PMP清除过程中发挥关键作用，并对内皮持续损伤起到调控作用。.本研究中我们发现，DCS发生后，血管内气泡可导致血小板数量明显下降，同时PMP生成量明显增加，且PMP生成量与气泡量之间具有明显的线性关系；利用抗血小板药物抑制血小板激活可有效降低DCS的发病率及死亡率，延长发病时间，提高生存周期。上述研究结果表明，血管内气泡诱导的血小板数量减少与PMP生成增加在DCS发生发展中发挥重要的作用。进一步研究发现，气泡诱导的PMP表面表达丰富的的磷脂酰丝氨酸（PS）。PS作为细胞膜的一种重要成分，在维持细胞膜稳定性中发挥重要作用，在细胞激活和/或凋亡时，胞内PS外翻。PS外露后可与含GLA结构域的Gas6形成有效结合，通过与内皮表面的Axl受体结合介导PMP的胞内摄取，并在内皮功能损伤中发挥重要作用，而利用Axl单坑可显著降低PMP的摄取。.因此，本项目中PS-Gas6-Axl介导的内皮PMP摄取及其损伤机制研究为DCS内皮继发损伤提供了新的研究思路；同时，系统阐明内皮PMP摄取机制又为PMP介导的内皮损伤提供了潜在的治疗靶点。