柞蚕杆状病毒(AnpeNPV)Bacmid表达系统的构建

为解决目前无柞蚕细胞株，使AnpeNPV表达系统无法应用的难题，构建AnpeNPV高效表达Bacmid系统。该Bacmid系统能在大肠杆菌中复制，从而在7～10天内获得重组病毒并能使外源基因高效表达。本项目采用AnpeNPV多角体基因强启动子为驱动高效表达外源蛋白。同时将F复制子重组到AnpeNPV中，从而将AnpeNPV改造成能在大肠杆菌中增殖的Bacmid系统。应用AnpeNPV Bacmid系统，高效表达GFP。我国柞蚕资源丰富，柞蚕以蛹滞育越冬，自然状态下蛹期可达半年，蛹个体大，无需饲养，适合规模化生产需要。AnpeNPV Bacmid系统的构建填补了杆状病毒表达系统的空白而且对促进基因工程产业化以及提高生物工程产业的经济和社会效益具有实际意义，对进一步开展柞蚕及柞蚕杆状病毒的分子生物学研究有重要的意义。