人工合成水蛭素羧端12肽cDNA,其5′端为HindⅢ粘末端,接着为ATG起始密码,与尿激酶B链cDNA重组。获得水蛭素羧端12肽和尿激酶B链融合基因。将此融合基因重组入大肠杆菌表达载体pBV220和PBV321,获得两株表达阳性克隆菌株。表达产物以可溶性和包函体两种形式存在。ELISA和溶解圈试验分析表明,表达产物具有与天然尿激酶相同的抗原性和激活纤溶酶原转变为纤溶酶的溶纤活性,这种溶纤活性可被抗尿激酶血清中和抑制;用TT法(凝血酶时间)测定表明,表达产物具有抗凝活性。Western blot试验分析表明表达产物分子量为引KD。两株克隆菌株的表达量分别为每立升培养物95000和30000尿激酶国际单位。
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数据更新时间:2023-05-31
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