栀子、三七有效组分对AD转基因动物突触功能重建的影响及其配伍机制

阿尔茨海默病（AD）是常见的神经退行性疾病，患者脑中病灶存在毒性病理产物的沉积以及神经元突触联系的大量丧失。栀子和三七配伍是治疗脑中风的有效的临床经验方，我们在临床应用中发现，服用数月后患者的认知能力有显著改善。另有大量临床研究报道，栀子和三七在AD临床治疗上有较好的疗效。我们前期试验显示，栀子苷和三七总皂甙配伍可以显著改善拟痴呆大鼠和AD转基因小鼠的学习记忆障碍。细胞实验也显示，二者配伍可以促进淀粉样蛋白损伤神经元的轴突生长。依据前期工作成果，我们提出其药效学机制的假说：栀子清热解毒，三七活血益气，二者配伍可以活血解毒，清除AD脑中有毒的病理产物，同时扶正补气，促进受损神经元轴突生长，恢复脑功能。本项目拟在前期研究基础上，进一步探讨栀子、三七改善AD患者大脑功能的疗效机制和配伍机制，即二者对AD转基因动物脑中毒性病理产物的清除和神经元突触功能重建的影响及其配伍机制。

淀粉样蛋白在脑实质中沉积可引起海马区神经元脱失、树突棘密度降低，从而影响脑认知功能。研究表明单纯清除毒性病理产物无法恢复脑功能，神经元突触连接的恢复才能改善认知障碍。淀粉样斑块是脑内的毒性病理产物，而神经元连接则构成了脑网络。因此，该认识与中医学“毒损脑络”而致络损神伤的病理机制具有高度一致性。. 本项目运用解毒通络方：三七、栀子提取物中的有效成分三七总皂苷和栀子苷配伍，研究二者在阿尔茨海默症转基因模型小鼠上作用的配伍机制。行为学实验证明三七和栀子配伍用药3个月后，可以促进7月龄转基因小鼠学习记忆能力的改善；二者改善学习记忆的机制在于降低海马淀粉样蛋白42/40的比例，促进突触形态学的恢复。我们在细胞上的研究，首次证明二者配伍可以促进淀粉样蛋白损伤神经元的轴突生长，表现为神经元突起的总长度明显改善，延伸距离较远。重要的是，此结果在动物实验中得到验证：二者配伍可以减少转基因模型鼠海马区神经元脱失，增加转基因鼠海马区神经元树突棘的密度。. 我们进一步的研究发现，三七总皂苷和栀子苷在体内和体外实验中配伍机制不同：体外研究中，三七总皂苷可以减少淀粉样蛋白生成，栀子苷促进突起生长；体内动物实验中，减少淀粉样蛋白生成和促进神经元突起生长的主要成分是三七总皂苷。同时，我们在动物模型上的初步研究表明，栀子苷和三七总皂苷配伍可以促进双转基因鼠海马区细胞增殖，双染的结果显示部分增殖细胞是血管内皮细胞。海马区的新生血管增多，提示整体动物血管系统可能参与了促进突触可塑性的效应。另外，行为学实验显示药物作用的有效剂量具有性别差异。上述将结果一方面显示了三七总皂苷和栀子苷配伍治疗阿尔茨海默症的机制，另一方面也提示二者作用可能与动物体内的血管系统、雌激素作用机制相关。. 本课题共计发表论文13篇，其中SCI收录的研究论文4篇，综述1篇，会议论文2篇。培养博士研究生1名，硕士研究生6名。获得专利一项。