microRNA靶向激活前列腺癌细胞p14基因的机制研究

最近的研究发现存在与RNA干扰（RNAi）相对的RNA激活（RNAa）现象。RNAa有可能成为一个强有力的生物工具并发展为针对癌症等疾病的一种新的治疗策略，但目前RNAa的机制尚未明了。细胞内自然存在的RNAa可能由靶向基因启动子区的微RNA（miRNA）来承担。在前期研究工作中，我们发现抑癌基因p14的启动子区可以筛选出若干个RNAa的靶点，而miR-222有可能靶向其中一个而激活p14的表达，提示我们RNAa可能参与对抑癌基因p14/p53通路的调节。基于这些工作，我们拟通过计算机软件预测、转染前列腺癌细胞、检测p14基因表达等方法筛选出靶向激活p14基因的miRNA，并进一步利用染色体免疫共沉淀等方法探讨miRNA靶向激活p14的可能机制，激活p14对下游基因的作用及相应的细胞学效应。希望可以深入探索RNAa的机理，为利用miRNA和RNAa实现前列腺癌的基因治疗寻找新的靶点。

最近的研究发现存在与RNA干扰（RNAi）相对的RNA激活（RNAa）现象。RNAa有可能成为一个强有力的生物工具并发展为针对癌症等疾病的一种新的治疗策略，但目前RNAa的机制尚未明了。我们拟通过计算机软件预测、转染前列腺癌细胞、检测p14ARF基因表达等方法筛选出靶向激活p14ARF基因的微RNA，并进一步利用染色体免疫共沉淀等方法探讨小RNA靶向激活p14ARF的可能机制，激活p14ARF对下游基因的作用及相应的细胞学效应。希望可以深入探索RNAa的机理。研究发现利用小RNA靶向激活p14ARF基因后，p14ARF基因的mRNA和蛋白表达水平显著上调。同时p14ARF的下游基因p53和p21表达上调，S期细胞显著减少，G1或G2细胞增多。结果证实：（1）靶向基因启动子区的小RNA可以激活p14ARF基因表达；（2）激活p14ARF基因可引起下游基因如p53和p21的表达上调，并抑制细胞周期，减少S期细胞，引起G1期或G2阻滞；（3）RNA激活可以作为膀胱癌、前列腺癌或其他恶性肿瘤基因治疗的一种潜在的有效手段。