开盖型扩展青霉脂肪酶的分子设计及其界面激活分子机制的研究

扩展青霉（Penicillium expansum）脂肪酶是一类广泛应用于洗涤剂添加剂等诸多工业领域的中温碱性脂肪酶。本项目拟通过比较扩展青霉脂肪酶"盖子"结构及其两侧铰链区的氨基酸序列与扩展青霉酯酶对应区域的氨基酸序列，根据酯酶的氨基酸序列，结合氨基酸性质，设计开盖型脂肪酶分子。运用基因工程手段，对脂肪酶盖子结构两侧铰链区的氨基酸进行定点突变、将脂肪酶"盖子"结构及两侧铰链区的氨基酸片段与酯酶对应区域的氨基酸片段相互置换，以期获得不影响脂肪酶活力和稳定性（或影响很小）的开盖型脂肪酶分子，以提高脂肪酶的催化效率及增强脂肪酶在两相催化系统中的稳定性。根据解析后的野生型扩展青霉脂肪酶分子3D结构提供的信息结合筛选到的脂肪酶突变体，借助分子动力学模拟和酶的各种光谱表征技术，从生物信息学和实验技术两个层面阐述扩展青霉脂肪酶界面激活的分子机制。