基于肺泡巨噬细胞功能失衡调节的理肺汤干预慢性阻塞性肺病的机制研究

The study is based on the pivotal link of the pathological mechanism of chronic obstructive pulmonary disease. Macrophages are the key effector cells that mediate inflammation. Phagocytosis and autophagy damage of macrophages are chronic The basis of inflammation, the regulation of macrophage imbalance is the bottleneck of drugs to prevent chronic inflammation COPD; select chronic obstructive pulmonary disease model of oxidative stress in mouse, impaired the function of macrophages, the first observation of Bronchoalveolar lavage fluid, lung tissue Macrophages in the aggregation, apoptosis and other states; on this basis from the immunohistochemistry, molecular biology and other multi-faceted, multi-method, multi-angle comprehensive dynamic study in vivo, observe the " Recuperating Lung Decoction " regulate macrophage phagocytosis and autophagy and the regulation of macrophage imbalance affect the chronic airway inflammation in COPD, to verify the " Recuperating Lung Decoction " excellent effect; finally clear " Recuperating Lung Decoction " regulation of macrophage imbalance in the treatment of COPD Target, target. For the first time, from the perspective of the imbalance of macrophages, we establish the experimental evidence that " Recuperating Lung Decoction " regulates the imbalance of macrophages and reveal the mechanism of its regulation and control of macrophage imbalance in the treatment of COPD.

肺泡巨噬细胞（Macrophage）是介导炎症的关键效应细胞，巨噬细胞的吞噬和自噬功能受损是慢性炎症迁延的基础，调控巨噬细胞失衡是药物遏止慢性炎症治疗COPD的瓶颈；选择慢性阻塞性肺病小鼠模型，围绕巨噬细胞功能受损，首先观测肺组织中巨噬细胞的聚集、自噬等状态；在此基础上从免疫组织化学、分子生物学等多层面，多方法、多角度研究，观察“理肺汤”调节巨噬细胞吞噬及自噬的情况及调控巨噬细胞失衡影响COPD气道慢性炎症的变化规律，验证“理肺汤”的优效性；最终明确“理肺汤”调控巨噬细胞失衡治疗COPD的靶向、靶点。研究首次从巨噬细胞整体功能失衡的角度建立“理肺汤”调控巨噬细胞失衡的实验证据，揭示其调控巨噬细胞失衡治疗COPD的可能路径。

巨噬细胞功能失衡是COPD 病理的重要机制之一，该研究依托COPD稳定期小鼠模型，围绕巨噬细胞功能受损，多方法、多角度进行研究，观察“理肺汤”调控巨噬细胞失衡影响COPD气道慢性炎症的变化规律，验证“理肺汤”的优效性，明确其调控巨噬细胞失衡治疗COPD的靶向、靶点机制。研究结果1. 研究成功建立了COPD稳定期小鼠模型。2. 理肺汤对COPD小鼠有具有良好疗效，可改善其呼吸功能。（1）COPD模型组小鼠肺功能指标下降。各给药组在给药治疗后肺功能得到改善。（2）COPD模型组小鼠气道呈高分泌状态，肺泡内有炎症细胞浸润，肺泡腔增大或破裂融合，肺泡毛细血管扩张增粗，小气道上皮增生或水肿。各给药组较模型组小鼠的以上病理情况情况得到不同程度减轻。（3）COPD模型组小鼠BALF中炎性细胞数量较空白对照组均升高，给药后RLD中、高剂量组和阳性药组淋巴细胞数量较模型组小鼠降低，中性粒细胞、巨噬细胞数量较模型组小鼠降低。3. 理肺汤能恢复巨噬细胞的吞噬功能，改善COPD炎性及氧化应激水平。（1）COPD模型小鼠巨噬细胞的吞噬功能受损，理肺汤能改善巨噬细胞的吞噬功能，其改善情况与阳性对照药相似。（2）COPD模型组小鼠IL-6、IL-8、IL-10、IL-1β、TNF-α、MIP-2、8-OHdG水平较空白对照组显著升高，干预后阳性药组和RLD高剂量组治疗后的炎性因子水平降低程度更为明显，能够改善COPD模型组小鼠炎症及氧化应激水平。4.RLD通过TLR4-PI3K-Akt-mTOR途径可能是调控COPD稳定期实现抑制炎症反应的途径。结论1.肺脾为核心两本多脏虚反映了COPD稳定期复杂的脏腑功能关系，肺脾为核心旨在强调中医肺主气呼吸功能的物质基础，两本提示要重视脏腑功能之源。2.联合应用番泻叶、隔天禁食、噪音和氢化可的松及CS和LPS复合方式能够建立两本多脏虚COPD稳定期模型。3.本课题研究证实了巨噬细胞吞噬功能受损是COPD病理机制之一，理肺汤能够改善AM吞噬功能，进而改善COPD的肺功能、氧化应激与炎症反应，而这一功能的实现与对TLR4-PI3K-Akt-mTOR信号通路的抑制相关。