CTHRC1在恶性黑素瘤侵袭及转移中的作用及机理研究

我们的预试验显示CTHRC1 在恶性黑素瘤特别是转移性恶性黑素瘤中高表达，可促进黑素瘤细胞黏附至细胞外基质中，并促进黏附至基质的瘤细胞存活。CTHRC1可能作为Wnt的辅助蛋白，促进黑素瘤细胞上皮型向基质型转化，调节肿瘤生长微环境，进而促进肿瘤的转移。本课题通过研究在恶性黑素瘤中CTHRC1对Wnt及其下游分子、对肿瘤生长微环境中的肿瘤相关成纤维细胞的生物学行为及其分泌的重要细胞因子的影响和上皮细胞间质转化(EMT)的作用，探讨其在恶性黑素瘤的侵袭和转移中的作用及机制。

本课题主要研究CTHRC1分子在恶性黑素瘤特别是转移性恶性黑素瘤中促进肿瘤发生的机制，目前研究表明，CTHRC1 可能作为Wnt 的辅助蛋白，促进黑素瘤细胞上皮型向基质型转化，调节肿瘤生长微环境，进而促进肿瘤的转移。本课题通过研究原位及转移性恶性黑素瘤中CTHRC1，Wnt 等下游分子的表达与临床病理特征的关联，发现该分子的表达与肿瘤的浸润深度及淋巴结转移有关。同时我们构建敲除CTHRC1的瞬转及稳转的黑素瘤细胞模型，发现CTHRC1能够促进黑素瘤细胞的生长与存活并促进上皮细胞间质转化(EMT)。进一步我们对于CTHRC1下游因子以及相关细胞因子进行了筛选，探讨其在恶性黑素瘤的侵袭和转移中的作用及机制。. 研究过程基本按计划进行，研究第一年时使用瞬时转染的技术，在低表达及高表达CTHRC1的黑素瘤细胞系中将CTHRC1转入或干扰掉，初步观察对其黑素瘤细胞凋亡，黏附行为的影响。为了进一步说明CTHRC1在黑素瘤上皮-基质化转变中的作用以及下一步的体内实验的进行，我们又构建特异性稳定转染shRNA慢病毒载体GV118-CTHRC1-RNAi，筛选稳定表达的细胞系，并检测可能参与上皮-基质化转变中的分子，此准备工作耗费了一定的时间，故体内实验进度有一定的拖延，体内实验目前还在进行中。.在此项研究项目遇到瓶颈的时候，我们进行了内皮素3（endothelin-3，ET-3）对人恶性黑素瘤A375，MMRU生物学行为影响以及上皮-基质化转变的研究，并发现这一途径有细胞外基质蛋白SPARC的参与，此项研究是上个自然科学基金项目的延续，也是此项目的补充，我们发现ET-3与CTHRC1均参与黑色瘤上皮-基质化转变，并参与细胞外基质蛋白的调节，两者之间的联系，也是未来研究的一个重要方向。