胃癌细胞中ING5蛋白核浆移动机理及其分子生物学功能研究

胃癌是严重威胁人类健康的恶性肿瘤之一，但其发生和演进的分子机制仍不清楚。课题组前期工作结果提示，胃癌发生过程中ING5蛋白出现核浆移动，浆表达阳性的胃癌出现高侵袭和转移的恶性生物学行为。本项目拟分析ING5浆表达胃癌组织中ING5 cDNA突变及变异体，揭示其细胞浆移动是否与核定位序列遗传学改变有关；检测 ING5突变和变异体表达水平改变后对胃癌细胞核质比、增殖、细胞周期、凋亡、分化、迁徙、侵袭、片状和侵袭伪足形成的影响；最后研究ING5突变和变异体编码核蛋白表达对HAT活性、组蛋白乙酰化水平及靶向结合基因的转录调节作用。此研究项目的顺利实施，可极大推动胃癌病因学的发展，丰富胃癌细胞中ING5基因的肿瘤抑制作用及分子机理研究，为胃癌早期诊断和晚期基因治疗提供一个新的分子靶点。

研究团队利用RT-PCR和实时PCR检测，发现胃癌组织中ING5 mRNA含量显著高于癌旁正常粘膜。免疫组化结果表明胃癌发生过程中ING5蛋白表达水平下降，核ING5表达与胃癌肿块大小、侵袭深度、淋巴结转移、临床病理分期以及不良预后呈负相关，浆ING5表达与胃癌侵袭深度、静脉侵袭、淋巴结转移以及临床病理分期呈正相关，淋巴结转移灶中浆ING5表达水平高于原发灶。我们利用脂质体方法将pEGP-N1-ING5表达质粒转入SGC-7901细胞中，根据融合GFP荧光鉴定出阳性克隆，Western和实时PCR结果显示阳性克隆中ING5表达升调。阳性克隆增殖减慢，细胞侵袭和转移能力减弱，细胞出现G1阻滞。ING5过表达增强SGC-7901细胞Akt、NF-κB和β-catenin信号传导通路，细胞组蛋白乙酰化未见显著变化。本研究小组利用CHIP发现胃癌细胞GT-3KB中ING5蛋白可与c-myc、Cyclin D1和p21启动子结合。本研究深入研究胃癌侵袭和转移的分子机制，寻找新的分子治疗靶点，有助于提高疗效，并为分子分型和分子分期提供线索。本研究揭示了异常ING5表达在胃癌发生和演进中作用，丰富了胃癌细胞中ING5基因的肿瘤抑制作用及分子机理，为胃癌早期诊断和晚期基因治疗提供一个新的分子靶点，对提高胃癌患者生存率和生存质量具有巨大促进作用。