NDOs对锦江黄牛瘤胃微生物生长、发酵、组成影响及适宜添加量与组合研究

根据微生态学和广义营养学原理，采用体内与体外、传统与现代相结合的方法,运用先进的"16S rDNA(rRNA)"技术、"PCR-DGGE " 技术及传统培养技术，探讨不同水平及组合NDOs对锦江黄牛瘤胃微生物生长、发酵及组成影响。.（1）不同水平及组合NDOs对瘤胃微生物DMNP、MOEFF及模型的影响；.（2）不同水平及组合NDOs对瘤胃微生物DGGE图谱带数（Ni）、总带数(N)及丰度（P）影响.（3）不同水平及组合NDOs对瘤胃微生物组成（总数及比例）的影响.(4)不同水平及组合NDOs对瘤胃发酵参数（MCP、VFA、pH、NH3-N）及内容物酶活的影响.通过研究，将阐明NDOs对锦江黄牛瘤胃微生物区系结构、多样性、种群动态、生长速率、生长模型及瘤胃发酵类型、特征、参数、发酵活力影响，得出锦江黄牛NDOs的适宜添加品种、水平及组合，为NDOs在锦江黄牛及其他反刍动物中应用提供依据。

采用体外批次培养、瘘管牛及PCR-DGGE 技术，探讨不同水平及组合NDOs对锦江黄牛瘤胃微生物生长、发酵及组成影响。.（一）不同水平及组合NDOs 对锦江黄牛瘤胃发酵的影响：首先，采用体外批次培养法。结果表明：功能性寡糖可以显著增加瘤胃产气量、BCP浓度、NH3-N利用率和NDF降解率，总挥发性脂肪酸（TVFA）浓度显著增加，乙酸/丙酸比值显著降低。综合分析， 0.8%甘露寡糖+1.0%果寡糖+0.8%大豆寡糖（简称GT1）和0.8%甘露寡糖+1.2%果寡糖+1.0%大豆寡糖（简称GT2）为较好理想组合。. 然后，采用自身对照的设计方法，研究了GTI和GT2对锦江黄牛瘤胃瘤胃发酵功能的影响。结果表明：2个组合寡糖对瘤胃液的pH值影响不显著（P＞0.05），但均能提高瘤胃液中NH3-N浓度和VFA浓度，降低瘤胃液中MCP浓度，以添加GT2（0.8%甘露寡糖+1.2%果寡糖+1.0%大豆寡糖）效果较好。.（二）不同品种、水平NDOs 对锦江黄牛瘤胃微生物生长效率的影响：采用体外培养方法。结果表明：不同水平的甘露寡糖、果寡糖及大豆寡糖，每日微生物氮产量（DMNP）有提高的趋势，但差异不显著（P＞0.05）。添加1.17%甘露寡糖， DMNP为59.72g， MOEFF最大；添加1.03%大豆寡糖，DMNP为59.50 g，MOEFF最大。寡糖的适宜添加水平为1.00%～1.20%。.（三）不同组合NDOs 对瘤胃固相、液相微生物多样性影响：采用PCR-DGGE技术。结果表明：（1）固相微生物PCR-DGGE图谱条带数影响不明显；（2）液相微生物PCR-DGGE图谱条带数明显增加，产生了12个特异性条带。其中，经测序分析，2株为产琥珀酸丝状杆菌(Fibrobacter succinogenes)，另外10株在基因库中为未培养菌。. (四) 不同组合对锦江黄牛瘤胃内容物酶活的影响：采用自身对照的方法，结果表明：添加寡糖组合能提高纤维素酶、木聚糖酶和总脱氢酶活性，未见提高瘤胃液中蛋白酶活性。.（五）功能性寡糖组合对稻草在锦江黄牛瘤胃降解率的影响：采用尼龙袋法，结果表明：添加功能性寡糖组合GT1和GT2期均能够极显著提高DM、OM、NDF、ADF降解率(P<0.01)，GT1和GT2之间差异不显著(P>0.05)；对CP降解率无显著影响(P>0.05)。