弥漫性轴索损伤早期诊断的特异性生物标志物的筛选

The early diagnosis of DAI is difficult in the clinical and forensic medicine .At present, how to diagnos the DAI accurately is the key point for the clinical and forensic medicine research.The method of histopathology is impossible to diagnosis DAI correctly early, it is urgent to look for the new biomarkers for DAI.This project will aim to establish DAI model of SD rats using the Marmarou method (experimental group), collect the samples(cerebrospinal fluid, blood and urine) in different time (injury group and surgical group were divided into 15 groups: 0h, 0.5h, 1h, 2h, 3h, 4h, 6h, 10h, 16h, 24h, 48h, 72h, 5d, 7d, 14d).The samples will be analysed by the GC-MS and LC-MS and the results be evaluated by suitable Statistics methods. The new and specific biomarkers of DAI will be found, which will provide important new evidences for making definite drug-treatment targets ,early diagnosis of DAI in clinical medicine and identification of forensic pathology .

弥漫性轴索损伤( diffuse axonal injury, DAI)是一种常见的颅脑损伤，其致死率、致残率和植物生存率高。如何客观准确的早期诊断DAI是当前临床医学和法医学研究的难点和热点。单纯的组织病理学方法难以早期诊断DAI, 寻找诊断DAI的新的生物标记物是当前亟待解决的难题。本项目旨在通过Marmarou法建立SD大鼠DAI模型，按相应时间点（致伤组和手术组分为0h、0.5h、1h、2h、3h、4h、6h、10h、16h、24h、48h、72h、5d、7d、14d等各15个时间点组）处死SD大鼠,收集其脑脊液、血液、尿液等用GC-MS和LC-MS等技术进行检测，对检测结果作科学的统计学分析，寻找且鉴定出DAI特异性生物标记物，以期为DAI早期诊断、药物治疗靶点的确定、法医学鉴定提供重要参考依据，本项目研究成果将具有重要的理论意义和潜在的巨大应用前景。

DAI是常见的颅脑损伤，致死率、致残率和植物生存率高。DAI的早期诊断一直是临床医学和法医学难以突破的瓶颈, 如何准确而客观的诊断DAI成为当前临床医学和法医学研究的关键和热点。单纯的组织病理学方法难以早期、准确诊断DAI, 寻找诊断DAI新的生物标记物是当前亟待解决的难题。本项目采用改良的Marmarou法成功建立SD大鼠DAI模型，按相应时间点（致伤组和对照组分为0h、0.5h、1h、2h、3h、6h、10h、16h、1d、2d、3d、5d、7d等各13个时间点组）处死致伤组和对照组SD大鼠并收集其脑组织、脑脊液、血液、尿液等。采用1H-NMR 对1天和3天组SD大鼠血浆检测，并进行模式识别分析，得到的组间代谢物差异明显（5组30个血浆样本分析鉴定出32种小分子代谢物有显著差异），故基于1H-NMR 的代谢组学检测技术在本研究中可行；同时发现DAI 1天时 Glu明显升高，3天时Lac显著升高，致伤组（1天和3天）脂质成分（VLDL和LDL）一直显著降低；这些有差异的小分子代谢物及其变化规律或可为DAI诊断的潜在特异性生物标志物的筛选提供可靠的实验依据。通过UPLC-MS对1小时，6小时和16小时组SD大鼠血浆进行代谢组学进行检测；通过iTRAQ对1小时，6小时，1天，3天和7天组SD大鼠脑组织进行蛋白质组学检测，对检测结果作科学的数据处理及统计学分析，均发现对照组与致伤组有明显差异，这些差异表明在DAI特异性生物标志物筛选的研究中，运用UPLC-MS及iTRAQ的方法是可行的；这些差异物有可能作为DAI特异性生物标志物的候选物质，但有待进一步分析证实。