人真皮成纤维细胞体外重编程为心肌细胞及其相关机制的初步研究

心肌细胞是难以再生的一种细胞类型，寻找心肌细胞来源对心肌再生具有重要的意义。尽管ESC或iPSC能够在体外分化为心肌细胞，但其应用于临床却受到心肌分化效率低、肿瘤形成等因素的限制。早在1990年就发现特定的转录因子能将一种细胞重编程为另一种细胞，为组织再生提供了新的细胞来源。最近的研究证明转导Gata4、Mef2c和Tbx5转录因子将小鼠成纤维细胞重编程为心肌细胞，但目前还没有证据显示是否通过该方法能将人真皮成纤维细胞重编程为心肌细胞，此外，细胞重编程过程中关键的表观遗传学调控机制尚不明确。我们已成功构建了人Gata4、Mef2c和Tbx5的慢病毒表达载体，本项目将研究：1）人真皮成纤维细胞是否可重编程为心肌细胞；2）microRNA微阵列比较分析重编程过程中的miRNA表达差异，寻找控制重编程关键的miRNA群，为提高心肌细胞重编程效率及进一步摆脱转基因方法奠定基础。

心肌细胞是难以再生的一种细胞类型，寻找心肌细胞来源对心肌再生具有重要的意义。尽管ESC或iPSC能够在体外分化为心肌细胞，但其应用于临床却受到心肌分化效率低、肿瘤形成等因素的限制。早在1990年就发现特定的转录因子能将一种细胞重编程为另一种细胞，为组织再生提供了新的细胞来源。最近的研究证明转导Gata4、Mef2c和Tbx5转录因子将小鼠成纤维细胞重编程为心肌细胞，但目前还没有证据显示是否通过该方法能将人真皮成纤维细胞重编程为心肌细胞。本研究采用Oct4、Sox2、c-Myc和Klf4多能性转录因子将人真皮成纤维细胞（HDF）重编程为KDR阳性的心肌祖细胞。在心肌诱导培养基诱导培养7天后，用人心肌细胞表面特异性标志SIRPA分选诱导后的细胞，获得了cTnT和α-sarcomeric actinin阳性的人心肌细胞。