癌组织中酪氨酸蛋白磷酸酶基因家族的表达和鉴定研究

应用受体型酪氨酸蛋白磷酸酶LAR基因cDNA探针进行Southern印迹杂交，在30例大肠癌中未发现该基因的重排和缺失现象；在酪氨酸蛋白磷酸酶基因保守区域设计一组引物，通过PCR可检测该基因家族的多个成员的RNA表达产物，初步实验表明这种通用引物RNA-PCR用于基因变异筛查有很大限制。新近资料表明，丝氨酸/酪氨酸蛋白磷酸酶在细胞周期和癌变中起重要作用。为此，本项研究应用PCR克隆了与CDK2结合的丝氨酸/酪氨酸蛋白磷酸酶KAP的cDNA，构建了KAP基因的真核细胞表达重组质粒；设计了能同时检测并区别CDC25丝氨酸/酪氨酸蛋白磷酸酶基因家族RNA表达的通用引物RNA PCR系统。以上实验研究工作为鉴定新的癌基因或抑癌基因提供了方法和手段。