高血压血管重塑中血管保护分子CREG基因表达的上游调控机制研究

From the perspective of vascular homeostasis regulation, exploring novel protective molecules repressing hypertensive vascular remodeling has become an active hot spot in the research field of prevention and treatment of hypertension. Cellular repressor of E1A-stimulated gene (CREG) is a newly discoveried endogenous molecule implicated in regulation of vascular homeostasis. Our recent studies suggested that CREG expression was reduced prior to the development of vascular remodeling in response to angiotensin II (Ang II). In addition, CREG deficiency aggravates Ang II-induced vascular remodeling in hypertension, indicating that CREG may be a key molecule in regulating hypertensive vascular remodeling, and down-regulation of CREG expression in arteries may promote hypertension. To further clarify the role of CREG in the process of hypertensive vascular remodeling, we firstly intend to establish animal models of secondary hypertension based on wild-type mice. Then recombination human CREG protein will be applied to identify the role of CREG in the treatment of hypertension and vascular remodeling. Finally, we sought to uncover the key molecules mediating the down-regulation of CREG expression induced by Ang II from the view of modulation of transcription factors. We will find out the upstream regulatory mechanism and the key molecules mediating CREG expression inhibition in the process of hypertensive vascular remodeling. The findngs provide an important idea and new therapeutic target for the prevention and treatment of hypertension and vascular diseases caused by vascular homeostasis.

从血管稳态调控角度，寻找对抗血管重塑的关键调控分子和信号通路，成为高血压病因学和治疗学领域新的、重要的研究方向。E1A激活基因阻遏子（CREG）是一个新发现的具有血管稳态调节作用的内源性分子，我们发现在血管紧张素II（Ang II）诱导的小鼠高血压模型中，主动脉中CREG基因表达下调早于血管重塑发生，并且CREG+/-小鼠的血管重塑程度较CREG+/+小鼠更为显著，我们推测：CREG是血管重塑中的关键调控因子，其表达降低促进高血压发生。本研究拟建立Ang II诱导的继发性小鼠高血压模型，通过重组人CREG蛋白外源性干预明确其在高血压血管重塑中的作用，并进一步从转录因子调控角度探讨CREG基因表达下调的分子机制。通过本研究的完成，尝试阐明高血压血管重塑中CREG基因表达抑制的上游调控机制，为临床高血压及血管稳态失衡引起血管性疾病的防治研究提供重要思路和新的治疗靶点。

血管重塑是高血压靶器官损害的一种显著性病理特征，分子水平上抑制高血压引发的血管重塑具有重要意义。CREG基因是溶酶体相关蛋白，在维持血管稳态方面发挥重要作用，有望成为防治高血压血管重塑的新靶点。前期研究中我们发现，高血压血管重塑过程中血管局部RAS系统过度激活，Ang II可能是导致血管稳态调控因子CREG基因表达下调的主要分子。因此，我们根据研究计划开展了如下研究：1）CREG在Ang II诱导的血管重塑发生及演进中的调控作用，2）Ang II诱导血管重塑过程中CREG基因表达抑制的上游调控机制研究，3）验证目标分子在Ang II调节CREG基因表达和血管重塑中的作用。研究结果发现：在Dah1盐敏感高血压大鼠及血管紧张素II诱导的小鼠高血压模型中，伴随着血管紧张素II的上调，CREG基因表达显著下降。上述模型中CREG表达的下调为血管紧张素II特异性的，与血压变化无关。在CREG低表达的CREG杂合子小鼠给予血管紧张素II之后，可以观察到主动脉及肠系膜动脉的血管中膜隆起及血管纤维组织较CREG正常表达小鼠呈明显增生趋势，给予人CREG蛋白后可阻断上述效应，上述提示了CREG基因表达的变化与基因调控有关，和基因表型改变无关。同时我们发现血管紧张素II可以刺激E26转录因子-1与CREG启动子绑定。进一步分析发现，血管紧张素II可通过刺激E26转录因子-1与CREG启动子区域（-1179bp 和-271bp）进而抑制其在的血管平滑肌的转录功能。同时，E26转录因子-1抑制剂可在主动脉阻断上述CREG减少趋势及血管管壁重构。通过本研究的完成，我们阐明了CREG基因表达在高血压血管重塑发生、演进及治疗中的作用，深入揭示调控CREG基因表达的上游分子机制，找到导致血管保护分子CREG表达下调和血管重塑发生的关键分子，并尝试通过该研究为高血压血管重塑防治提供新的研究方向和干预靶点。