淀粉样前体蛋白胞内结构域对神经细胞钙稳态的影响及机制研究

β淀粉样前体蛋白（amyloid precursor protein，APP）经β/γ分泌酶水解后产生淀β粉样蛋白（β-amyloid peptide，Aβ）和APP胞内结构域（APP intracellular domain，AICD）。已知Aβ在AD发病机制中起关键作用，而AICD的生理与病理功能还不清楚；本课题拟采用细胞转染方法产生AICD表达阳性的SHEF-SF细胞和原代培养海马细胞，观察AICD对细胞内钙稳态的影响，同时对其机制进行探讨。通过对于AICD的深入研究将是探明AD发病机制过程中的一个重要环节。同时，在AICD所介导的信号传导通路中可能含有许多潜在的药物靶点，针对这些靶点设计相关药物来治疗AD，具有重要的科学意义和广泛的应用前景。

本课题制备了表达AICD50和AICD59质粒，并将其转染至人神经瘤SK-N-SH细胞和原代培养的海马神经细胞，观察AICD对细胞内钙稳态的影响，同时探讨其对线粒体和内质网钙库的影响。结果表明：AICD可以增加神经细胞内游离钙离子浓度，诱导细胞内钙调蛋白（CaM）表达增加，下调钙调蛋白依赖性激酶（CaMKⅡ）；可上调细胞线粒体内MPTP孔道蛋白中VDAC、ANT和CypD蛋白和基因表达；同时上调内质网中钙泵入孔道SERCA和NCX的表达，使内质网钙通道开放，而对内质网上钙泵出孔道IP3R表达无影响。提示AICD可以对神经细胞线粒体和内质网结构和功能产生损害作用，机制可能是通过损伤海马细胞内线粒体钙库和钙库功能，使线粒体内钙浓度增加而发挥神经毒性作用的。目前，课题组参加国际国内会议4人次，已经发表相关中文文章2篇，1篇英文文章正在投稿中。