VEGF基因工程内皮祖细胞对造血干细胞移植并发HVOD的防治作用及其作用机理研究

肝静脉闭塞病（HVOD）是造血干细胞移植（HSCT）的常见并发症，具有较高的发病率和一定的死亡率。目前治疗手段有限，一旦发生，将在很大程度上影响患者预后，故探索其预防措施具有重要意义。.肝窦和肝小静脉内皮损伤、血小板激活、血栓形成是HVOD的主要病理基础。修复损伤内皮、阻止血栓形成是探索其防治措施的潜在有效靶点；内皮祖细胞（EPC）具有修复损伤内皮、抑制血小板活化、聚集、粘附和血栓形成的作用；我们的前期研究已发现，EPC能改善同基因HSCT小鼠的肝病理改变。故在此基础上，本研究拟构建高效促内皮修复的基因工程EPC，探索基因工程EPC对HSCT-HVOD的防治作用，进一步分析内皮损伤在HSCT-HVOD发生中的作用机理及EPC修复的机制。如获成功，则可为HSCT-HVOD的防治开辟一个新的研究方向，并有助于进一步深入阐明HSCT-HVOD的发生机理。

肝静脉闭塞病（GVHD）是造血干细胞移植的主要并发症之一，该病的发生、发展与肝窦内皮损伤密切相关，为此，本研究以携带VEGF的工程内皮祖细胞为工具，探索内皮细胞修复对HVOD的防治作用。研究发现，1. 培养的骨髓来源的内皮祖细胞具有天然内皮祖细胞的特性，携带VEGF的工程内皮祖细胞能归巢到照射预处理后损伤的内皮系统的部位。2. 依据Deleve大鼠评分标准，本研究制定了小鼠HVOD评分标准，并发现造血干细胞移植中采用BU/CY预处理方案诱发的HVOD较全身照射预处理的重。TBI预处理小鼠多表现为中至重度HVOD，无明显腹水出现； BU/CY预处理小鼠多表现为重度HVOD，并可见明显腹水。3. 给予内皮祖细胞输注，可以明显减轻HVOD的发生率和严重程度。移植时联合输注EPC能有效促进损伤的肝窦内皮及肝细胞修复，减少血小板活化及相关细胞因子的释放，改善肝功能。4. 即使通过修复损伤肝窦内皮细胞能促进肝功能恢复，但不能完全阻止肝纤维化的进程，NF-KB不仅参与肝细胞的修复也参与肝纤维化。异基因骨髓移植并发HVOD早期肝细胞内NF-κB信号通路的活化促进了损伤肝细胞的修复，但其持续活化则促进了肝纤维化的形成。lncRNA uc0091dv.1可通过调节IKKβ的表达，参与NF-κB信号通路在HVOD中的作用。5. 肝细胞是肝脏的效应细胞，造血干细胞移植并发的HVOD中，肝细胞存在损伤及损伤后的修复，Notch1信号通路参与其调控；lncRNA 0610009E02Rik是Notch1的正性调节子，参与移植后HVOD受损肝细胞的修复；但其机理有待深入探索。深入探索若获成功，则为进一步深入了解造血干细胞移植后HVOD的发生机理。