多型人乳头瘤病毒致癌基因计算机分析生物学验证和应用

人乳头瘤病毒（HPV）引起宫颈癌等症，寻找其致癌基因片段，用于诊断和治疗，是当前国际热点。从HPV高危组E7多重配列中，找出致癌基因片段；DLXCXE。它在HPV-16E7中，是第21-22位的天冬氨酸和亮氨酸，第24，26位的半胱氨氨酸和谷氨酸，第23和25位为非保守氨基酸。它正是致癌基因pRb与HPVE7的结合域。为了验证该致癌片段，设计引物，把HPV-16E7第24位突变为基氨酸。经细胞转化表型检测，观察到大量E7-NIH3T3细胞集落，说明转化后细胞具有停泊不依赖生长特性，而突变后细胞无。将上述转染细胞分别接种到裸鼠，两周内接种E7-EIH3T3转染细胞裸鼠皮下，长出肿块；接种突变E7转染细胞裸鼠无肿生成。表明前者对裸鼠有致癌作用，而后无者无。证明致癌片段准确。