Corilagin抗ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化作用及其对LOX-1/TLR4/NF-κB信号转导通路的调控研究

项目组在前期研究基础上，拟采用ApoE-/-小鼠复制动脉粥样硬化(AS)模型，评价三个暴露剂量的Corilagin干预抗AS作用及其剂量-效应关系；体外培养HUVEC和主动脉VSMC，研究Corilagin对ox-LDL损伤内皮细胞、刺激VSMC迁移及细胞周期的影响。以LOX-1、TLR4 及其下游信号分子MyD88与TRAF-6，和NF-κB及其靶基因TNF-a与MCP-1为靶标深入探索Corilagin干预对主动脉粥样斑块、培养的HUVEC和VSMC中LOX-1/TLR4/NF-κB信号转导通路的调控作用和干预环节，从在体动物、斑块组织、细胞和分子水平深入研究Corilagin的抗AS作用并阐明其细胞分子机制，为将Corilagin研究成为具有自主创新和云南药用植物来源的抗AS药物提供科学的理论和实验依据。项目实施，可培养硕士和博士研究生，发表论文7-9篇，其中SCI收录4-6篇。

动脉粥样硬化（atherosclerosis, AS）是以富含脂肪的斑块在大动脉壁聚积为特征的系统性疾病，是大多数心脑血管疾病的主要病理基础。动脉壁血管内皮细胞（vein endothelial cells, VECs）损伤和血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells, VSMCs）增殖在AS发生发展中起着关键作用。因此，寻找有效的药物对预防和治疗AS至关重要。项目组前期研究发现，源于滇产叶下珠药用植物的活性成分corilagin呈浓度依赖性保护ox-LDL及血小板活化因子损伤的血管内皮细胞，具有抗血栓形成作用。在此基础上，本项目拟复制实验性动脉粥样硬化模型和ox-LDL损伤血管内皮细胞及血管平滑肌细胞模型，从整体和细胞分子水平进一步评价corilagin抗动脉粥样硬化作用，探讨其可能的作用机制。结果表明，Corilagin能明显减轻AS动物胸主动脉病变程度、降低血清TC、LDL-C和TG水平，升高HDL-C的水平。Corilagin能明显下调动脉粥样硬化动物主动脉斑块中ox-LDL受体LOX-1和TLR4蛋白及mRNA表达水平。在体外培养的细胞中，Corilagin明显提高HUVEC抗氧化能力，减轻内皮细胞损伤，corilagin能抑制ox-LDL引起的G2/M期细胞阻滞，改善ox-LDL的细胞毒作用；Corilagin能在mRNA和蛋白水平上降低ox-LDL损伤的HUVEC中LOX-1、TLR4、MyD88、NF-kB、TNF-α、MCP-1等基因的表达，从而减轻ox-LDL对HUVEC的损伤。Corilagin能明显抑制ox-LDL损伤的VSMC的增殖和迁移，对VSMC细胞周期的作用主要是作用在G1/S期。Corilagin能在mRNA和蛋白水平上降低ox-LDL刺激的VSMC中上述基因的表达。该项目为将corilagin研究成为具有自主创新和云南药用植物来源的新型抗动脉粥样硬化药物提供科学的理论和实验依据。