MicroRNA-486-5P调节CML干细胞生物学特性的作用与机制研究

MicroRNA参与造血干细胞恶性转化及白血病的发生发展。本组前期研究发现microRNA-486（miR-486）在CML CD34+细胞中高表达，并与BCR-ABL 激酶活性具有相关性，提示miR-486可能参与CML发病。本研究将比较CML干祖细胞亚群中miR-486的表达差别；利用慢病毒介导的miR沉默策略，确定miR-486对CML细胞增殖、分化、凋亡及静息等生物学特性的影响；确定高表达miR-486对正常造血干细胞恶性转化的作用；利用生物信息学、生物芯片及3'-UTR报告系统确定miR-486调节CML细胞生物学特性的靶基因，阐明其调控机制；利用逆转录病毒介导的小鼠造血干细胞bcr-abl基因转移模型，阐明沉默miR-486对bcr-abl诱导白血病发病的阻断作用。该课题将阐明miR-486调控CML干细胞生物学特性的作用与机制，为靶向CML干细胞治疗提供新靶点。

MicroRNA 参与造血干细胞恶性转化及白血病的发生发展。前期研究发现microRNA-486（miR-486）在CML CD34+细胞中高表达，并与BCR-ABL 激酶活性具有相关性。但是miR-486在正常造血干细胞增殖分化及参与CML 发病的作用和机制并不清楚。本项目主要研究了miR-486在CML干祖细胞中的表达差别、功能及调控机制。主要研究进展研究成果包括：（1）证明了miR-486 是影响造血干细胞向红细胞分化的特异 miRNA并证明其促进红系分化的作用。MiR-486 高表达促进CD34+ 细胞向红系分化，而敲除miR-486 则阻断向红系分化。(2) miR-486 在CML　MEP细胞组分中高表达，并与BCR-ABL 促进红系增殖有关。miR-486的上调依赖bcr-abl的酪氨酸激酶活性。（3）MiR-486调节CML干祖细胞增殖分化等生物学特性。慢病毒介导的干涉miRNA-486 抑制CML细胞的增殖，并能够克服T315I等突变导致的细胞耐药。（4）miR-486在慢性粒细胞白血病细胞调控pten和Akt信号途径，并且FoXO1在造血细胞上部分介导miR-486的生物学作用。（5）在不同肿瘤模型中，miR-486 发挥不同的生物学作用，如在肝癌模型中则通过抑制CLDN10 和CTRON发挥生物学效应。（6）miR-486 是一种低氧反应miRNA ,miR-486 介导低氧诱导骨髓间充质干细胞的血管生长因子分泌。上述进展和发现从功能上证明了miRNA-486是调节造血干细胞增殖和红系分化的重要miRNA， 并通过调控Pten和FOXO1等靶分子参与CML 细胞恶性增殖及耐药性调控，抑制miR-486 促进CML 细胞凋亡并克服细胞的耐药性。上述结果为靶向CML干细胞治疗提供了新的靶点。本项目共培养研究生5名，博士后1名。在Blood, BBRC, Hepato Res 等杂志发表研究论文11篇。