基于肺络构效和肺热络瘀理论的清络饮协调TH1/TH2细胞因子平衡干预特发性肺纤维化机制研究

The prevention and treatment of Idiopathic Pulmonary Fibrosis （IPF）in its acute phase influences the restoration of structure and function of lung tissue and the degree of progress of pulmonary fibrosis. Previous clinical observation shows that Qing Luoyin, based on the pathogenesis called “Feire Luoyu”and the collateral disease theory，can be effective intervention of idiopathic pulmonary fibrosis by improving the physiological characteristics and functions of pulmonary collaterals ；Experimental researches show the imbalance of TH1/TH2 cytokines play an important role in a variety of mechanisms involved in IPF，and IL-12、IL-4、INF-γand IL-4/INF-γare receiving more and more attentions because they can reflect the state of balance of TH1/TH2 cytokines.Our research group，based on literature research，thinks that the process of transition from the physiological characteristics and functions of pulmonary collaterals to the pathogenesis called “Feire Luoyu” is similar to the process of transition from the imbalance of TH1/TH2 cytokines to balance of the TH1/TH2 cytokines.So we will take the study of TH1/TH2 cytokines as an entry point，conduct experiments of whole animal，and use the methods of the methods of ELISA、Western-blot、RT-PCR and so on to clarify the mechanism that Qing Luoyin is effective intervention in IPF by coordinating the TH1/TH2 cytokines balance.This will provide the scientific basis for prevention and treatment of IPF in its acute phase,at the same time,deepen connotation of the collateral disease theory.

IPF急性发作期的防治情况影响肺组织结构、功能的恢复以及纤维化程度的进展。前期临床研究显示，基于“肺热络瘀”病机和络病理论的清络饮能够有效干预IPF，改善肺络的结构和效能（即肺络构效）；实验表明，多种机制参与IPF的发病，而Th1/Th2细胞因子失衡在其中扮演重要角色，其中IL-12、IL-4、INF-γ及IL-4/INF-γ最能反应Th1/Th2细胞因子的平衡状态，正受到越来越多的关注。课题组则以文献研究为基础，认为IPF发病过程中由肺络构效转变为肺热络瘀格局的过程与Th1/Th2细胞因子由平衡转向失衡以及其造成的肺组织结构和功能的改变具有相似性。故开展整体动物实验，以Th1/Th2细胞因子研究为切入点，采用ELISA、Western-blot、RT-PCR等方法，阐明清络饮通过协调TH1/TH2细胞因子平衡干预IPF的机制，为IPF急性发作期的防治提供科学依据，并深化络病理论内涵。

AE-IPF作为IPF常见的终末事件具有发病急骤、发病率高、致死率高等临床特点，并逐渐成为国内外研究热点及难点。课题组则以文献研究为基础，认为IPF发病过程中由肺络构效转变为肺虚络瘀格局的过程与Th1/ Th2细胞因子由平衡转向失衡以及其造成的肺组织结构和功能的改变具有相似性。故拟开展整体动物实验，以Th1/Th2细胞因子研究为切入点，采用ELISA、Western-blot、RT-PCR等方法，阐明清络饮通过协调TH1/TH2细胞因子平衡干预IPF的机制。.实验结果：1阐明基于肺络构效失衡理论IPF急性加重核心病机（肺热络瘀）理论；2.采用BLM两次气管内注射的方法成功建立大鼠AE-IPF模型；3.揭示基于肺络构效和肺热络瘀理论组方之中药复方清络饮能够有效改善IPF大鼠（尤其AE-IPF阶段）咳嗽、喘息、发绀、体重下降等一般状态；降低W/D和肺系数；增强肺内气体交换功能，改善低氧血症；有效改善AE-IPF阶段“UIP+DAD”基本组织病理表现，减轻肺泡炎和纤维化程度，阻断Fb向MFb转化，抑制ECM生成，有效延缓IPF向AE-IPF发展的病理进程，改善AE-IPF病理状态。4.验证IPF（包含AE-IPF期）发生发展过程中存在Th1/Th2细胞因子失衡（Th2漂移）发病机制，并证实不同时相IPF大鼠血清IL-12含量与IL-4/INF-γ比值呈高度负相关、肺组织IL-12mRNA与IL-4 mRNA/INF-γmRNA比值呈高度负相关，验证IL-12在维持Th1/Th2细胞因子平衡方面存在重要作用。. 本实验阐明中药复方清络饮可抑制Th2代表性细胞因子——IL-4表达，促进Th1代表性细胞因子——IFN-γ表达，促进Th1/Th2关键维稳细胞因子——IL-12表达，进而改善Th1/Th2细胞因子失衡状态发挥治疗作用。即清络饮可能通过协调Th1/Th2细胞因子失衡，延缓肺热络瘀病机格局进展，促进恢复肺络构效（肺络的结构和功效），进而延缓AE-IPF的进展作用机制。丰富、发展、深化了络病理论内涵，为AE-IPF的防治提供科学依据，为中医药治疗和改善AE-IPF提供新的思路，为新药研发提供基础。