环状RNA-0000471以竞争性内源RNA方式结合miR-135a-5p调控LATS2促进胃癌发生的机制及其临床意义研究

Circular RNAs (circRNAs) are a special class of endogenous RNAs characterized by jointing 3’ and 5’ends reverse covalent together. Our previous studies have shown that circ_0000471 has good tissue specificity and tumor promoting effect, but its mechanisms in gastric carcinogenesis are unknown. Bioinformatics prediction and previous experiments showed that circ_0000471 is highly likely acting as competing endogenous RNA (ceRNA) in combination with miR-135a-5p to regulate LATS2 level in gastric carcinogenesis through Wnt/β-catenin and Hippo signaling pathway. Thus, taking ceRNA as the breakthrough point, we decide to use gene transfection, RNA interference, Western blot, RNA binding protein immunoprecipitation (RIP), immunohistochemistry and other methods to investigate whether circ_0000471 regulates LATS2 to promote gastric carcinogenesis by ceRNA, the molecular mechanism of circ_0000471 in carcinogenesis and its clinical value in gastric cancer screening, classification, prognosis, recurrence and metastasis from four levels of molecules, cells, tissues and animal experiments. Our study will provide new ideas for the study of the pathogenesis of gastric carcinogenesis.

环状RNA（circRNA）是一类5'末端和3'末端反向共价键结合的内源性RNA分子。前期研究发现circ_0000471具有良好的胃癌组织特异性和促癌作用，但其参与胃癌发生的机制未明。生物信息学预测及前期实验显示circ_0000471极有可能是以竞争性内源RNA（ceRNA）方式结合miR-135a-5p调控LATS2的表达，通过Wnt/β-catenin和Hippo信号通路促进胃癌发生的。为此，本研究以ceRNA为切入点，利用基因转染、RNA干扰、Western印迹、RNA结合蛋白免疫沉淀（RIP）、免疫组化等多种研究手段，从分子、细胞、组织和实验动物这4个水平探究circ_0000471是否以ceRNA方式调控LATS2促进胃癌发生，阐明circ_0000471促癌的下游分子机制，同时明确其用于胃癌筛查、分型、预后、复发转移预测的临床价值。本研究将为胃癌发病机制研究提供新思路。

环状RNA（circRNA）是一类5'末端和3'末端反向共价键结合的内源性RNA分子。前期研究发现circ_0000471具有良好的胃癌组织特异性和促癌作用，但其参与胃癌发生的机制未明。本研究以ceRNA为切入点，利用基因转染、RNA干扰、Western印迹、免疫组化等多种研究手段，从分子、细胞、组织和实验动物这4个水平探究circ_0000471是否以ceRNA方式调控LATS1/2促进胃癌发生，阐明circ_0000471促癌的下游分子机制，同时明确其用于胃癌筛查、分型、预后、复发转移预测的临床价值。本项目建立了血浆、胃液circ_0000471检测方法体系，通过比较circ_0000471分子在各期胃癌患者、癌前病变、良性胃病患者和健康人血浆、胃液中的检测情况，明确了组织、血浆及胃液中circ_0000471水平与胃癌组织病理分级、分期及患者预后的相关性，及其作为胃癌筛查标志物的临床意义及其诊断价值，为临床应用奠定基础。功能研究显示胃癌细胞内低表达的circ_000047促进胃癌细胞增殖、侵袭转移、克隆形成及细胞周期运行。分子机制研究显示circ_000047是通过circ_0000471/miRNAs/LATS1/2分子调控网络参与Hippo和Wnt/β-catenin信号传导通路的调控发挥促癌作用。本研究将为胃癌发病机制研究提供新思路。