组织工程化聚四氟乙烯在修复大鼠面神经损伤中的作用与机制

本课题围绕面肌痉挛等颅神经疾病的共同发病基础（脱髓鞘）进行研究，试图通过组织工程化聚四氟乙烯胶原/壳聚糖复合材料的制备与应用，探索促进髓鞘修复的有效途径。研究内容与方法包括（1）SD大鼠面神经干局部脱髓鞘动物模型制作，（2）利用自体脂肪干细胞诱导分化雪旺氏细胞并在体外培养增殖，（3）从外周血中分离出巨噬细胞并在体外增殖培养，（4）雪旺氏细胞与巨噬细胞在活体蛛网膜下腔内的自然进程与生物学功能，（5）聚四氟乙烯胶原/壳聚糖复合材料的制备与组织工程化，（6）组织工程化聚四氟乙烯在修复面神经脱髓鞘损伤中的作用与机制。本课题的完成有望建立一套利用自体脂肪组织和外周血进行雪旺氏细胞与巨噬细胞诱导分化和分离培养的技术，实现普通材料聚四氟乙烯的组织工程化，并能明确新材料在促进面神经髓鞘修复中的作用与分子机制，为临床治疗面神经等周围神经损伤开辟新途径。

本课题围绕面肌痉挛等颅神经疾病的共同发病基础（脱髓鞘）进行研究，试图通过组织工程化聚四氟乙烯胶原/壳聚糖复合材料的制备与应用，探索促进髓鞘修复的有效途径。研究内容与方法包括（1）SD大鼠颅内段面神经干局部脱髓鞘动物模型制作，（2）利用自体脂肪干细胞诱导分化雪旺氏细胞并在体外培养增殖，（3）聚四氟乙烯胶原/壳聚糖复合材料的制备与组织工程化，（4）组织工程化聚四氟乙烯在修复面神经脱髓鞘损伤中的作用与机制。本项目组成功制作SD大鼠面神经干局部脱髓鞘动物模型，模型稳定可靠，重复性好。SD大鼠脂肪组织中提取脂肪干细胞，在体外分离培养鉴定，诱导分化为雪旺氏细胞，并鉴定，该细胞表达S100和GFAP。成功制备复合雪旺氏细胞组织工程化聚四氟乙烯胶原/壳聚糖复合材料，该材料中细胞能正常生长和分布，并能表达S100和GFAP。行为学检测和神经电生理检测均显示复合材料植入组面神经功能有明显改善，神经传导速度明显加快（p<0.05)。神经组织学检测显示组织工程化材料组神经脱髓鞘改变明显恢复，可见神经外围髓鞘组织，细胞分布欠均匀，毛细血管略增多，仍有炎性细胞。Westernblot实验结果证实，所有组均有GDNF表达，其中复合材料组在术后一月GDNF仍有高表达。本课题建立一套利用自体脂肪组织进行雪旺氏细胞诱导分化和分离培养的技术，实现普通材料聚四氟乙烯的组织工程化，并能明确新材料在促进面神经髓鞘修复中的作用与分子机制，为临床治疗面神经等周围神经损伤开辟新途径。