MSCs抑制类风湿关节炎FLSs介导的软骨破坏机制研究

类风湿关节炎（RA）是一种以软骨和骨破坏为核心病理过程的慢性自身免疫病，其机制主要为滑膜成纤维样细胞（FLSs）在各种因素作用下，释放基质金属蛋白酶（MMPs）等，降解软骨。我们在临床工作中使用间充质干细胞（MSCs）移植治疗部分难治性RA患者，取得一定疗效。通过MSCs治疗wistar大鼠CIA模型疗效观察，及治疗前后关节滑膜MMPs和粘附分子表达影响；同时体外MSCs与RA FLSs共培养，观察MSCs对FLSs表达MMPs、粘附分子抑制作用；观察MSCs对MMP基因调控核心转录因子JNK、ERK、AP-1表达抑制作用；观察MSCs对RA FLSs迁移侵蚀能力影响，来探讨MSCs与RA FLSs的相互作用。为临床推广应用MSCs输注治疗RA提供理论依据。

在本项目中，我们成功制备了大鼠CIA模型，并培养了UCMSCs和FLSs，造模成功的Wistar大鼠随机分为MSCs移植治疗组（MSC组）、细胞对照组（FLS组）、疾病对照组（CIA组），10只正常的Wistar大鼠作为正常对照组（Normal组）。研究结果发现，MSC组大鼠关节AI低于FLS组和CIA组(p<0.05)；HE染色示CIA大鼠造模后踝关节出现炎性细胞浸润及关节腔狭窄，但MSC治疗组关节间隙明显好于CIA组和FLS组；CIA组和FLS组TNF-α、IL-1β、IL-6水平均高于正常对照组，MSC治疗组TNF-α、IL-1β、IL-6水平较CIA组和FLS组均有显著下降（p<0.05）；TGF-β在Normal组与CIA组间差异无统计学差异，但输注MSC后TGF-β得到上调（p<0.01）。CIA大鼠滑膜组织较正常鼠高表达MMP1、MMP3、MMP13和cadherin-11，UCMSCs治疗后，滑膜组织MMPs和cadherin-11表达下调。RA患者FLSs MMP1、MMP3、MMP13和cadherin-11水平明显高于OA患者。经UCMSCs体外共培养后，MMP13、cadherin-11水平有效下调，而MMP1、MMP3反而上调。共培养后UCMSCs表达IDO、HGF、IL-10等可溶性细胞因子水平明显增多。加入IL-10抗体后UCMSCs抑制MMP13和cadherin-11表达的能力减弱。因此我们得出结论，UCMSCs移植能通过抑制炎性细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6，上调抑炎细胞因子TGF-β来减轻CIA大鼠关节炎症；并通过分泌可溶性细胞因子IL-10抑制类风湿关节炎滑膜组织MMPs和cadherin-11表达，从而减轻关节软骨破坏。