人参皂甙Rg3延缓乳腺癌三苯氧胺耐药及其机制的研究

三苯氧胺（TAM）是乳腺癌主要的内分泌治疗药物，耐药的发生严重影响了其疗效。目前，耐药机制不清，如何克服耐药是一个亟待解决的难题。最新研究表明血管内皮生长因子VEGF过表达与TAM敏感性下降有关，抗血管生成治疗有延缓TAM耐药的作用。人参皂甙Rg3是一种抗血管生成中药，主要通过降低VEGF的表达起作用。本研究拟在体外诱导TAM耐药的过程中，设计不同浓度的人参皂甙Rg3干预组，观察耐药发生时间，证实人参皂甙Rg3在TAM耐药发生中的作用；应用VEGF刺激实验和VEGF siRNA抑制实验证明人参皂甙Rg3影响TAM耐药的作用机制；将MCF-7、MCF-7/TAMR 、MCF-7/T+R 细胞种植于裸鼠，体内验证人参皂甙Rg3对TAM耐药发生的影响。人参皂甙Rg3延缓TAM耐药的作用一旦被证实，将为临床联合应参一胶囊和TAM提供理论基础，也为乳腺癌TAM耐药的预防和治疗提供一条新思路。

用TAM诱导MCF-7耐药时，加入不同浓度的人参皂甙Rg3，用MTT法检测细胞对TAM的抑制增殖作用，观察耐药发生时间，发现不同浓度（5x10-6mol/L-5x10-8mol/L）人参皂甙Rg3均具有延缓MCF-7细胞TAM耐药的发生时间. 1x10-8mol/L和5x10-8mol/L人参皂甙Rg3延缓耐药时间最长。检测MCF-7、MCF-7/TAM、MCF-7/T+R三组细胞中VEGF、MAPK活性及雌激素靶基因转录的变化，进行VEGF刺激实验和VEGF抑制实验，体外实验证实Rg3降低VEGF水平，抑制了MAPK的活化，进而延缓了耐药的发生。将MCF-7、MCF-7/T+R、MCF-7/TAMR细胞接种于裸鼠季肋部皮下,成瘤后,每组裸鼠再分为四组分别给予TAM、Rg3、TAM+Rg3及安慰剂,观察肿瘤生长情况及裸鼠生存期，体内验证人参皂甙Rg3对乳腺癌细胞TAM耐药的影响及可能机制。项目按计划完成实验内容，无调整，培养硕士生2名。得出结论：尽管TAM最初能降低MCF-7细胞的增殖，随着细胞适应性改变建立起利于生存的信号途径，导致耐药的发生。实验初步证明传统中药人参皂甙Rg3不仅具有一定的抑制乳腺癌细胞生长的作用，还具有延缓乳腺癌三苯氧胺耐药形成的功效。本研究进一步探讨了人参皂甙Rg3通过抑制VEGF/MAPK信号通路延缓乳腺癌三苯氧胺耐药的机制，为乳腺癌内分泌耐药的预防和治疗提供理论依据，同时也为拓展祖国传统药物新的应用领域和治疗方式做有益的探索。