基于整体作用的当归补血汤效应物质基础及体内过程研究

Danggui Buxue Decoction (DBD) is a classical prescription which has been widely used to nourishing blood in clinical practice. Our prophase research showed that DBD had nourishing blood effect definitely, but the material basis and in vivo process were still not totally clear. In view of this, selective knock-out strategy which based on holistic effect of TCM was employed to study the material basis of nourishing blood effect of DBD, and the absorption, distribution and metabolism process of main bioactive components were studied systematically. Herein, the work we will carry on is mainly divided into three parts: (1) Based on the generated reasons of blood deficiency syndrome and nourishing blood characteristics of DBD, model of blood deficiency syndrome will be established and evaluation indexes will also be preferred. (2) Selective knock-out strategy and multi-index comprehensive index method are used to obtain the main bioactive components and evaluate of nourishing blood effect. (3) Study of integrated pharmacokinetic, tissue distribution and metabolites are adopted to investigate variation of the main bioactive components in vivo with animal level. Ultimately, we will reveal the intrinsic essential of the effectiveness of DBD, and providing ideological and methodological demonstration towards the modern research of pharmacodynamic fundamentals of Chinese medicines.

当归补血汤是一首补血的经典方剂，临床疗效确切。本课题组前期研究表明当归补血汤确有补血功效，但其补血效应物质基础及体内过程仍未完全明确，鉴于此，本项目拟采用基于中药整体作用的选择性剔除策略对当归补血汤进行补血效应物质基础研究并对主要活性成分的吸收、分布及代谢过程进行系统研究。拟开展工作如下：（1）基于血虚证产生原因及当归补血汤补血特性，建立最适用于评价当归补血汤补血作用的动物血虚模型及相关指标；（2）基于选择性剔除策略对剔除后的样品进行补血效应评价，分析得出某一类或某几类补血效应较强的成分及各成分的贡献度，基于多指标综合指数法对当归补血汤剔除不同部位及不同效应成分后的补血效应指标进行整合，综合评价其补血效果；（3）基于整合药物代谢动力学、组织分布及代谢产物研究从整体动物探讨当归补血汤主要效应物质的体内变化。最终揭示当归补血汤治疗功效的内在本质，为中药效应物质基础的现代研究提供思路与方法示范。

本项目以效应-物质-机制为主线，结合系统生物学、代谢组学、蛋白质组学等现代研究手段，以当归补血汤经典效应——养血补血为切入点，研究其养血补血功效物质、体内过程及作用机制。项目主要完成研究工作及阶段性研究成果如下：1、本项目以中医药理论为指导，建立了生物效应系统评价体系，评价当归补血汤在不同病理模型下的补血效应，提示当归补血汤对复合血虚模型及失血性血虚模型均具有显著的治疗作用，而对于癌性贫血小鼠模型效果不佳，但与rhEPO和铁联用后治疗效果显著，同时还发现三药联用后不仅具有显著的补血效应，还具有抗肿瘤活性；2、采用网络药理学方法，筛选出一系列潜在的活性成分，并以失血性血虚模型为基础，评价了当归补血汤中阿魏酸、咖啡酸、丁基苯酞、藁本内酯、毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷和黄芪甲苷IV在正常及血虚模型大鼠血浆中的药代动力学差异，结果发现这七种活性物质在正常和血虚大鼠体内的某些药动学性质有显著性差异；通过比较阿魏酸、咖啡酸、毛蕊异黄酮苷、芒柄花苷和黄芪甲苷IV在正常及血虚模型大鼠组织分布差异发现正常大鼠与模型大鼠相比，不同时间点不同脏器中各活性成分含量大部分具有显著性差异；3、通过网络药理学、代谢组学及蛋白质组学方法分别对虚拟靶点、内源性差异标志物及差异蛋白进行研究，结果发现当归补血汤主要是通过抑制胸腺细胞凋亡、促进脾脏细胞线粒体能量代谢来增强免疫及促进造血的。4、通过比较当归补血汤、rhEPO和铁对癌性贫血小鼠的肠道多样性的调节作用，找到了与癌性贫血密切相关的3种菌属，与肿瘤增长相关的7种菌属。.通过项目实施在国内外学术刊物发表论文6篇，其中SCI收录5篇；培养硕/博士研究生2名。基于项目研究成果，继续申请获得江苏省研究生科研创新计划项目一项。